FITC与氨基反应原理: FITC与氨基反应是一种亲核进攻取代反应,即亲核试剂(氨基基团)攻击亲电试剂(异硫氰基团的碳原子)产生生成物。该反应通常在碱性pH条件下进行,例如使用氢氧化钠(NaOH)或碳酸钠(Na2CO3)的缓冲溶液。FITC分子中的异硫氰基具有较强的亲电性,易于受到亲核试剂(含有自由氨基的分子)的亲核
FITC与氨基的反应需要一定的条件,主要包括pH值、温度和反应时间等因素。一般情况下,反应pH值为8.0-9.0,温度为室温或4℃,反应时间为1-2小时。此外,在反应过程中还需要加入一定量的缓冲液来维持反应体系的稳定性。 五、FITC标记蛋白质的步骤 1. 准备FITC溶液:将FITC溶解在二甲基亚砜(DMSO)中,制备出一定浓度的FITC...
1. 活性酯化反应:FITC-NHS通过其活性酯(NHS酯)部分与生物分子中的游离氨基官能团发生反应,形成稳定的酰胺键连接。这种反应通常在碱性条件下进行,因为NHS酯在碱性环境下更稳定。反应的产物是被FITC标记的生物分子。 2. 氨基官能团:在生物大分子中,如蛋白质、抗体、寡核苷酸等,通常含有氨基官能团,即氨基(NH2)基团。这...
1. 活性酯化反应:FITC-NHS通过其活性酯(NHS酯)部分与生物分子中的游离氨基官能团发生反应,形成稳定的酰胺键连接。这种反应通常在碱性条件下进行,因为NHS酯在碱性环境下更稳定。反应的产物是被FITC标记的生物分子。 2. 氨基官能团:在生物大分子中,如蛋白质、抗体、寡核苷酸等,通常含有氨基官能团,即氨基(NH2)基团。这...
FITC与伯氨基的反应需要无水吗 反应原理是FTIC上的亲电基团。所以你无水的目的是让伯胺基保持孤对电子而不是与水电离出的氢离子结合，从而使其进攻能力减弱。调碱性的目地就是为了在该pH下，伯胺基带孤电子，和无水的意义相同。
FITC是荧光标记中常用的试剂之一,其具有较高的有机溶剂溶解性,因此可广泛用于官能化合物的氨基化反应。此类反应的目的是将氨基基团引入所需材料,从而赋予其新的性质和应用潜力。 3. FITC与氨基反应的基本原理 FITC与氨基反应的基本原理是亲电取代反应。在该反应中,FITC中的异氰酸酯基团与官能化合物中的氨基发生反应...
FITC与氨基反应通常发生在碱性条件下,碱性环境有助于提供氨基的亲核性。碱性环境还可以促进反应速率和产物稳定性。 机理解析 FITC与氨基反应发生的机理如下: 1. FITC中的异硫氰酯官能团(N=C=S)受到氨基的亲核进攻,形成临时亲电子簇(N=C=S←Nu)。 2. 临时亲电子簇中的离域电子对重新排列,形成氨基酯过渡态。
FITC通过异硫氰酸酯基(R-N=C=S)与多肽的氨基反应。 反应式如下 注:PH>8以上的碱性环境主要是为了使蛋白中的所有氨基处于非质子化,也特别提出了降低反应pH到7可以使FITC仅与N端α-氨基反应而不与赖氨酸上的ε-氨基反应。 FAM通过羧基和多肽的氨基反应,生成肽键。 反应式如下 2、反应条件不同 FITC与FAM相比...
FITC标记反应原理: 蛋白质分子的赖氨酸残基的游离氨基可与FITC发生亲核反应,形成硫脲连接而共价结合。 操作过程: 一、实验前准备: 1. 仔细阅读使用说明书。 2. 计算待使用FITC的量。 3. 提前20 min从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温(注:不需要用到的FITC继续放置冰箱中)。
异硫氰酸荧光素（FITC）是一种常见的荧光染料，常用于生物医学领域中的荧光免疫分析、荧光染色等应用中。一、基本化学结构异硫氰酸荧光素（FITC）是一种有机荧光染料，其基本化学结构是由一个带有发色团（通常是芳香环或杂环）和一个异硫氰酸酯基团组成的。异硫氰酸酯基团可以与蛋白质或其他生物分子中的氨基反...