FITC(Fluorescein Isothiocyanate)荧光素是一种敏感的荧光染料,存储时需要注意以下要求以确保其稳定性和荧光性能: 1.避光:FITC荧光素对光敏感,因此在存储和操作过程中应避免长时间暴露在强光下。可以将FITC荧光素保存在阴暗、避光的环境中,如包裹在铝箔纸中或使用黑色玻璃瓶进行存储。 2.低温:FITC荧光素应在低温下存储...
Annexin V-FITC荧光信号呈绿色,PI荧光信号呈红色;3使用流式细胞仪正确分析Annexin V-FITC/PI双染的细胞前要求仪器的荧光补偿来去除两种染料激发光之间的叠加。因为荧光补偿设置与PMT的电压直接相关,所以不同仪器之间的补偿不同。建议在实验开始阶段分析经Annexin V、PI分别单染的细胞来调整荧光补偿去除光谱重叠。根据未...
1.将纯化的IgG抗体对PH9～9.5碳酸盐缓冲液透析过夜，透析后抗体液移入小烧杯中 2.称取适量IFTC，加入二甲亚砜(DMSO)(FITC～1mg/1ml DMSO)使终浓度为1mgFITC／1mlDMSO FITC／IgG比例:如IgG浓度为1mg／ml，FITC／IgG比例约为50μgFITC／mgIgG；如IgG为5～10mg／ml，则比例为25μgFITC／ml IgG 在10ml小...
在生物医学领域，研究细胞膜的通透性对于了解细胞的生命活动和药物的作用机制至关重要。其中，荧光标记的葡聚糖（FITC-Dextran）被广泛用于测定细胞膜的通透性1. 准备实验材料：包括FITC葡聚糖、细胞株、PBS缓冲液、荧光显微镜等。2. 细胞处理：将细胞株按照实验要求进行预处理，如药物处理、基因转染等。3. 加样：将FI...
Annexin V, FITC标记是一种模联蛋白膜联蛋白,膜联蛋白是在钙存在下与磷脂膜结合的蛋白质家族。膜联蛋白V是研究细胞凋亡的有用工具。它被用作探针以检测在细胞表面上表达磷脂酰丝氨酸的细胞,这是细胞凋亡中发现的特征以及其他形式的细胞死亡。有多种参数可用于监测细胞活力。膜联蛋白V-染料结合物广泛用于通过测量磷脂...
三、实验特点 灵敏度高：可检测早期细胞膜变化。钙离子依赖性：需在缓冲液中加入钙离子以维持Annexin V的结合活性。多色兼容性：FITC的绿色荧光可与其他荧光染料（如PI的红色荧光）搭配使用，实现多参数分析。四、主要应用领域 细胞状态研究：用于区分细胞的不同状态，如观察细胞膜完整性和磷脂分布的改变。生物膜研究...
在进行亲和素结合实验时，首先要确保细胞处于良好的生长状态，通常采用合适的细胞培养基和培养条件进行培养。接下来，将5-FITC Biotin溶解于适当的溶剂中，制备成一定浓度的标记溶液。将标记溶液缓慢加入到含有细胞的容器中，确保细胞与标记物充分接触。然后，将细胞置于适宜的温度和环境下孵育一段时间，让标记物有足够...
2.FITC标记抗体实验流程 (1)用500ml FITC标记缓冲液在4℃透析纯化的单抗,共2d。期间更换2或3次缓冲液(通常情况下,5ml的1-2mg/ml的抗体可以用500ml缓冲液)。在A280处检测吸光度,确定抗体浓度(=A280×0.74×稀释倍数)。 (2)每毫克抗体加入20微升的5mg/ml FITC。室温孵育2h。
FITC-OVA(异硫氰酸荧光素标记的卵清蛋白)是一种常用于免疫学、生物化学等领域的实验试剂。它结合了FITC(异硫氰酸荧光素)的荧光特性和OVA(卵清蛋白)的免疫原性,使得在实验中可以方便地观察和追踪卵清蛋白的分布和相互作用。 荧光显微镜观察:
实验的重点是在48小时的观察期内从纤维蛋白水凝胶中释放250 kDa的异硫氰酸荧光素(FITC)-右旋糖酐(FD),该纤维蛋白水凝胶中含有不同浓度的成纤维细胞或内皮细胞。与无细胞凝胶相比,在纤维蛋白凝胶中添加细胞可使总释放量降低一小部分(成纤维细胞降低7–15%,内皮细胞降低6–8%)。释放曲线显示受多种细胞活动的...