1 推荐使用酶标仪进行双波长检测,测定450 nm和630 nm波长下的OD值,并用450 nm的OD测定值减去630 nm的OD测定值。 2 ELISA的样本和标准品通常要设置1~2个复孔进行检测,分别求出标准品、样本吸光度的平均OD值。 3 每个标准品和样品的OD值应减去空白孔的OD值。 4 以标准品浓度为横坐标,吸光度OD值为纵坐标,推荐...
步骤如下: 1.标曲和样本孔每个孔OD450值减去OD630或OD570值; 2.再将获得的标曲和样本孔数据分别减去空白孔,再进行下面的分析: ①拟合标曲(选择R2值大于0.99的比较好的拟合方式,必要时可以删除个别差异较大的标曲点进行拟合,直线或曲线拟合都可以) ②计算样本值,将样本减去空白孔的OD值复制,选软件中的“粘贴...
Frdbio提示:TMB底物反应时间与温度有关,比较适宜温度为25℃左右;温度太低,反应速度慢,温度高,背景较深,边缘效应严重。 试剂盒实验数据有效性判定: 阴性对照孔 OD450(或OD450/OD630)>0.900 阳性对照孔 OD450(或OD450/OD630)<0.300 本试剂盒典型数据: 阴性对照孔 OD450(或OD450/OD630)=1.966 阳性对照孔 OD4...
450nm为主波长，测样本显色的吸光值（450nm为最大吸收锋）+试剂底色和孔板自身的吸光值等，600nm为副波长实际为585nm,一般用570或630nm,用于排除试剂底色和孔板自身的吸光值等干扰因 素，最终样本显色的实验吸光值＝OD450－OD600
沟通之后,确认原始空白孔读值为0.0962,明显偏高,正常OD450的空白孔读值应为0.06左右。 在这里,小编建议有条件的小伙伴,尽量要用我们推荐的双波长校正法,使用570或630nm波长进行校正,OD450 - OD570/630即为校正后的OD值,可直接用于计算,也可根据数据质量,再进行空白校正。如没有双波长的酶标仪,读取OD450数据后,...
阴性对照孔 OD450(或OD450/OD630)=1.966 阳性对照孔 OD450(或OD450/OD630)=0.102待检测样品中中和抗体检测判定方法: 用抑制率来判定样本中抗SARS-CoV-2中和抗体的水平,公式如下:判定所参照的标准: 抑制率≥20% 判断结果为阳性 说明检出SARS-CoV-2中和抗体 ...
沟通之后,确认原始空白孔读值为0.0962,明显偏高,正常OD450的空白孔读值应为0.06左右。 在这里,小编建议有条件的小伙伴,尽量要用我们推荐的双波长校正法,使用570或630nm波长进行校正,OD450 - OD570/630即为校正后的OD值,可直接用于计算,也可根据数据质量,再进行空白校正。如没有双波长的酶标仪,读取OD450数据后,...
ELISA相关重要概念介绍 1.OD值与A值：ELISA比色结果的一般用通用光密度（Oplical Density，OD）来表示，现按规定用吸光度（Absorbence，A）作为简称，OD值及A值两者含义相同，都是指用酶标仪的比色结果。2.单波长及双波长：是指用酶标仪比色时，直接用底物的吸收波长读值，以前常用的底物OPD的吸收波长为492nm，...
注:空白对照孔只加显色剂和终止液,如用450nm/630nm双波长读数,无需做空白对照。OD值 =OD450-OD630。 判断结果 1、每个标准品和标本的OD值应减去空白孔的OD值,如果做复孔,求其平均值。 2、使用计算机软件以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的CRP标准品浓度为横坐标(X),生成相应的标准曲线(建议用4参数曲线拟合)...
通常的表示方法是,将吸收波长写于A字母的右下角,如OPD的吸收波长为492nm,表示方法为“A492nm”或“OD492nm”。 4.6.3 酶标比色仪 酶标比色仪简称酶标仪,通常指专用于测读ELISA结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同,各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套{MOD}酶标仪。酶标仪的主要...