步骤如下: 1.标曲和样本孔每个孔OD450值减去OD630或OD570值; 2.再将获得的标曲和样本孔数据分别减去空白孔,再进行下面的分析: ①拟合标曲(选择R2值大于0.99的比较好的拟合方式,必要时可以删除个别差异较大的标曲点进行拟合,直线或曲线拟合都可以) ②计算样本值,将样本减去空白孔的OD值复制,选软件中的“粘贴...
1 推荐使用酶标仪进行双波长检测,测定450 nm和630 nm波长下的OD值,并用450 nm的OD测定值减去630 nm的OD测定值。 2 ELISA的样本和标准品通常要设置1~2个复孔进行检测,分别求出标准品、样本吸光度的平均OD值。 3 每个标准品和样品的OD值应减去空白孔的OD值。 4 以标准品浓度为横坐标,吸光度OD值为纵坐标,推荐...
7、在酶标仪上读取 450 nm/630 nm 的吸光度。 标准的结果分布模式如上图所示: ELISA 酶标板显色由阴阳性区域第一行第一列孔向外显均匀放射状递减;如果在包被梯度方向上 OD450 过高无梯度,应该继续降低包被浓度;反之,则增加。同理,如果在免疫血清稀释度方向上 OD450 过高无梯度,则应继续加大稀释度,反之,则...
沟通之后,确认原始空白孔读值为0.0962,明显偏高,正常OD450的空白孔读值应为0.06左右。 在这里,小编建议有条件的小伙伴,尽量要用我们推荐的双波长校正法,使用570或630nm波长进行校正,OD450 - OD570/630即为校正后的OD值,可直接用于计算,也可根据数据质量,再进行空白校正。如没有双波长的酶标仪,读取OD450数据后,...
沟通之后,确认原始空白孔读值为0.0962,明显偏高,正常OD450的空白孔读值应为0.06左右。 在这里,小编建议有条件的小伙伴,尽量要用我们推荐的双波长校正法,使用570或630nm波长进行校正,OD450 - OD570/630即为校正后的OD值,可直接用于计算,也可根据数据质量,再进行空白校正。如没有双波长的酶标仪,读取OD450数据后,...
1. 包被抗原:用包被液将抗原作适当稀释, 一般为1～10μg /孔,每孔加200μl,37℃温育1小时后,4℃冰箱放置16～18小时。 2. 洗涤:倒尽板孔中液体,加满洗涤液,静放三分钟,反复三次,最后将反应板倒置在吸水纸上,使孔中洗涤液流尽。 3. 加封闭液200μ...
比色结果的表达以往通用光密度(oplical density,OD),现按规定用吸光度(absorbence,A),两者含义相同。通常的表示方法是,将吸收波长写于 A 字母的右下角,如 OPD 的吸收波长为 492nm,表示方法为"A492nm"或"OD492nm"。 (3) 酶标比色仪 酶标比色仪简称酶标仪,通常指专用于测读 ELISA 结果吸光度的光度计。针...
产品参数pH值：≤2应用：ELISA使用方法ELISA显色终止步骤：1. 显色：各孔加入TMB显色液（货号：AP37L114） 100μL，孵育一定时间，溶液逐渐变蓝。2. 终止：加入TMB显色终止液（450nm）各100μL，终止后，溶液变为黄色。3. 检测：用酶标仪检测OD450或OD450/630。注意事项1. 本产品仅限于科学实验研究使用，...
通常,单波长读板的测定值一般是指以对显色具有最大吸收的波长如450nm或492nm进行比色测定;而双波长读板的测定值一般是敏感波长如450nm的吸光值与非敏感波长下如630nm的吸光值之差,可排除板内脏物的影响。 同时,由于ELISA测定中单个空白孔的非特异吸收上有一定程度的不确定性,也就是说每次测定或同次测定空白孔...
通常,单波长读板的测定值一般是指以对显色具有最大吸收的波长如450nm或492nm进行比色测定;而双波长读板的测定值一般是敏感波长如450nm的吸光值与非敏感波长下如630nm的吸光值之差,可排除板内脏物的影响。 同时,由于ELISA测定中单个空白孔的非特异吸收上有一定程度的不确定性,也就是说每次测定或同次测定空白孔...