酶标抗体法,又名酶联免疫吸附法(ELISA),利用酶标记抗原或抗体以检测相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。其基本原理是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性,而相对应的抗体或抗原与某种酶连接成酶标抗体或抗原,酶标抗体或抗原既保留了免疫活性可以与固相载体表面的抗原或抗体结合,又保留了酶...
直接ELISA法 将抗原直接吸附(或通过捕获抗体结合)到固相载体表面,洗涤除去未结合的抗原及杂质。加入酶标抗体进行孵育,使酶标抗体与固相载体上的抗原结合,形成固相免疫复合物。彻底洗涤除去未结合的酶标抗体。加入底物,酶催化底物反应生成可检测的产物(例如显色或发光产物)。产物的颜色或荧光强度与标本中受检抗原的...
本文将叙述板式 ELISA 各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球 ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。 1. 标本的采取和保存 可用作 ELISA 测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排...
酶联免疫吸附分析方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)是一种免疫检测方法,通常用于测量生物样品中的抗体或抗原,包括蛋白质或糖蛋白。像其他免疫检测法一样,它们依靠抗体与目标的结合来促进检测。Elisa具有特异性强、灵敏度高、方法简捷、分析容量大、检测成本低等优点,一般不需要贵重仪器,可简化或省去前处理...
酶联免疫检测(ELISA)是常见的抗体或抗原测定方法。ELISA是基于相关联的酶对那些免疫复合物发生酶催化反应进行测定的。抗体可以固定在一个有表面涂层的塑料板上,因此经简单洗涤这块塑料板,免疫复合物就易于与其他组分分开,而进行测定。简介 酶联免疫检测法(PSTVd除外)全过程包括病毒抗原的分离与纯化、病毒抗血清的...
间接酶联免疫吸附试验是测定抗体最 常用的一种酶联免疫吸附试验(ELISA)方 法,属非竞争结合试验。其原理是将抗原连 接到固相载体上,样品中待测抗体与之结合成固相抗原受检抗体复合物,再用酶标二 抗(针对受检抗体的抗体)与固相免疫复合 物中的抗体结合,形成固相抗原-受检抗体- 酶标二抗复合物,可用目测或...
ELISA 法是一种免疫测定技术,利用抗原抗体结合的手段,实现细胞或组织内生物活性物质的检测和定量。融合后的杂交瘤细胞可以产生大量相同的抗体,而细胞融合是一个随机的过程。 在已经融合的细胞中,有相当比例的无关细胞的融合体,需进行筛选和克隆化,而这种杂交瘤阳性克隆的筛选中,需对单克隆抗体进行检测,常用方法有酶...
直接法ELISA是最早建立的一种ELISA类型,适用于分子量较大的抗体或抗原。以抗体检测为例:将抗原包被在反应板中,加入酶连接的特异性抗体,与固定化的抗原反应,加入合适的底物量,酶催化显色,通过检测光信号大小来进行测定。该方法灵敏度低,背景干扰大,目前很少使用。
双抗原夹心ELISA 反应模式与双抗体夹心法类似。将固相抗原和酶标特异性抗原分别取代固相抗体和酶标特异性抗体,就可用双抗原夹心法测定样品中的抗体。优点:该方法不受非特异性IgG的干扰,背景干扰小,受检抗体不需要稀释。缺点:技术难度较高,需要制备高质量的酶标抗原。相信大家现在已经了解了ELISA的基本原理及方法学...