三、研究内容和方法 1. 选取合适的抗体对,制备脂联素 ELISA 试剂盒,并进行性能评价; 2. 优化 ELISA 检测条件,包括酶标板涂板浓度、样品稀释倍数、酶标反应时间等; 3. 测定一定数量的正常人群脂联素水平,制定正常参考值范围; 4. 收集糖尿病、肥胖、心血管疾病等疾病患者血清标本,对其脂联素水平进行检测,分析其与疾...
双抗体夹心ELISA检测方法的建立1.材料与方法 1.1检测样品的制备 2C3株抗牛安氏隐孢子虫卵囊壁特异性单抗,其制备和纯化方法参照文献。标准阳性粪便,采自粪栓阳性牛粪;标准阴性粪便,为经3次不同时间采粪便集虫后,抗酸染色卵囊均为阴性的牛粪,交叉反应粪便,为集虫粪检仅球虫或结肠小袋纤毛虫感染而无隐袍子虫感染的...
ELISA方法学建立考量点 首先明确ELISA方法开发的目的,如果是进行大分子定量,包被的抗原远远过量是方法稳定的必然选择;如果是进行ELISA的亲和力分析,包被的抗原少量是方法稳定的必然选择。其次是做好平台的搭建工作,如关键试剂的选择和稳定性、测试格式的选择(抗体、稀释液、微孔板、检测系统等)、标准曲线模型的选择、样本...
获得的纯化蛋白作为包被抗原;然后,确定ELISA方法的抗原包被浓度、封闭液和封闭时间、血清和二抗稀释比例和孵育时间、显色时间和判定标准;之后进行重复性试验、与猪的其他主要病原抗血清的交叉反应性和确定血清最大稀释倍数;最后,用建立的方法...
倍他米松ELISA检测方法的建立
竞争抑制ELISA方法的检测建立 一、 抗体的酶标记及质量鉴定 本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上[1],标记完后取上清用Sephedex G200 凝胶层析进行纯化,洗脱液为0.2mol/L pH7.4的PBS,流速为15ml/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光度计测A280吸光度值,以洗脱体积为横坐标,吸光值为纵坐标做...
摘要:为建立一种检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的间接ELISA(iELISA)方法,对构建的ASFV P30基因表达工程菌诱导表达后,将获取的重组ASFV P30蛋白进行纯化和Western-blot检测,然后以纯化的重组蛋白为抗原,建立了ASFV抗体iELISA检测方法,并进行了特异性、...
本文旨在建立一种间接ELISA 检测β2 毒素的单克隆抗体方法以提高β2 毒素的检测准确率和速度。 方法: 1. 材料和试剂: 产气荚膜梭菌菌株、β2 毒素、抗β2 毒素单克隆抗体、羊抗鼠 IgG辣根过氧化物酶(HRP)标记物、3,3',5,5'-四甲基苯亚胺(TMB)、1M HCl,96 孔 ELISA 板,洗板缓冲液(英文简写为 PBS.)...
有些标本可直接进行测定(如血清、尿液)，大部分ELISA检测均以血清为标本。制备血浆标本需借助于抗凝剂，...
所建立检测方法检测结果与LC-MS/MS法检测结果的线性回归方程为y=0.99x-0.02,R2=0.9966,该检测方法与LC-MS/MS法具有相同的检测能力,提高了检测速度,为玉米中FBs检测提供了有效的手段。 本文《基于磁性纳米颗粒伏马菌素B双探针竞争ELISA检测方法的建立》来源于《食品科学》2023年44卷08期345-351页。作者:孙宇,孟宪...