在ELISA 中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育, 在 ELISA中似不恰当。ELISA 属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法...
竞争ELISA 竞争ELISA既可用于检测抗体,也可用于检测抗原。以检测抗体为例,将抗原固定在固相载体上,首先加入待检抗体,再加入酶标抗体,则待检抗体就与酶标抗体竞争结合包被在固相载体上的抗原。通过洗涤洗掉未被竞争结合的酶标抗体,最后加底物显色,需要注意的是显色结果与待检抗原(或抗体)的量成反比。优点:可...
竞争法ELISA一般用于检测小分子抗原。小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,无法同时与两种抗体结合因此不能用双抗体夹心法进行测定,故可以采用竞争法模式。一般常用于小分子、lgA、lgG、lgM等检测。该技术测抗原的原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多,结合...
ELISA检测抗原的方法和原理主要基于抗原-抗体的特异性结合以及酶的高效催化作用。以下是详细的解释: 一、ELISA检测抗原的方法 ELISA检测抗原的方法主要包括直接法、间接法、双抗体夹心法和竞争法。这些方法的主要区别在于抗原、抗体的结合方式以及酶标的应用。 直接法:将抗原直接包被在固相载体上,加入待测样本后,样本中...
elisa检测原理及方法是什么 酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种常用的生物化学分析技术,主要用于检测和定量目标抗原(如蛋白质、激素、小分子等)在样本中的含量。它利用特异性抗体与抗原的结合反应,并通过酶标记的二抗进行信号放大,以达到高灵敏度的检测。 ELISA 的原理...
一、直接ELISA直接ELISA是一种直接检测目标物质的ELISA方法。在直接ELISA中,将特异性抗体直接固定在酶标板上,然后加入标准品或生物样品,使其与抗体结合。加入酶标二抗,使其与特异性抗体结合,形成酶标二抗-特异性抗体-目标物质的复合物。最后加入底物,根据颜色反应程度对目标物质进行定量分析。直接ELISA的优点是操作...
【实验方法】 一、ELISA间接法间接法是检测抗体最常用的方法,其原理为:利用酶标记的抗抗体检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。 1. 包被固相抗原:用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3min,除去未结合的抗原...
ELISA方法的原理是将目标物质(抗原或抗体)固定在特定的固相载体上,然后用特异性的酶标记抗体或抗原与目标物质发生特异性结合,最后通过酶的催化作用,使用合适的底物将酶活性转化为可测量的颜色、荧光或发光信号。ELISA常见的几种类型包括直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA和夹心ELISA。 直接 直接ELISA方法是将目标物质与酶...