1.5 检测与分析 荧光显微镜观察：威尼德紫外交联仪固定细胞后，于转染后24/48/72小时采集荧光图像，ImageJ软件统计阳性细胞比例。qPCR定量：使用某试剂提取总RNA，反转录后扩增EGFP基因（引物序列：F-5'-GACGTAAACGGCCACAAGTTC-3'，R-5'-GAACTTCAGGGTCAGCTTGC-3'），以β-actin为内参。Western Blot验证：某试...
荧光定量PCR(qPCR):检测荧光蛋白的基因表达量 酶联免疫吸附试验(ELIS):检测荧光蛋白的表达量 蛋白质印迹法(Western Blot):检测荧光蛋白的表达量 EGFP的表达产物检测方法 荧光检测法 原理:利用EGFP的荧光特性进行检测 步骤:将表达EGFP的E.coli细胞进行荧光显微镜观察 结果:观察荧光信号判断EGFP表达情况 注意事项:避免荧...
egfp病毒样颗粒的制备方法,包括: 76.(1)引物设计与合成: 77.所述引物包括设计引物cs ‑ egfp ‑ f和cs ‑ egfp ‑ r,以及菌液鉴定引物egfp ‑ꢀ 鉴定 ‑ f和egfp ‑ 鉴定 ‑ r: 78.具体的,根据snapgene软件,采用同源重组技术设计引物cs ‑ egfp ‑ f、 cs ‑ egfp ‑ r及菌液...
Keywords:ERstress,nonclassicalsecretion,Pichiapastoris,qPCR 嗜甲醇毕赤酵母表达系统作为一种广泛应用的高效蛋白表达系统,已被证明适用于多种外源重组蛋白的表达 [1-3] 。毕赤酵母能直接将外源重组蛋白分泌至培养基中,而且只分泌少量的内源性蛋白,非常有利于后续的外源重组蛋白的纯化。此外,一些胞内过表达的特殊外源...
1.7 RT-PCR 及全时定量 PCR(qPCR)检测 各组细胞以 Trizol 法提取总 RNA(按说明 书操作),琼脂糖凝胶电泳检测所提取 RNA 的 完整性,逆转录反应合成 WTX cDNA,逆转录 - 多聚酶链反应(RT-PCR)扩增 WTX 和 GAPDH (引物见 1. 2 引物设计)。扩增条件:变性 95 ℃ ...
小鼠抗eGFP单克隆抗体,中文名称:小鼠抗eGFP单克隆抗体英文名称:Anti-eGFPmousemonoclonalantibody相关类别:标签抗体储存:冷冻(-20℃)避光宿主:Mouse抗原:eGFP反应种属:eGFP标记物:Unconjugate克隆类型:mousemonoclonal技术规格Background:Greenfluorescenceprot
qPCR引物 分生常用耗材 环境消毒 RNA提取 RAN保存 常用耗材 吸头 离心管 试剂瓶 仪器 试剂盒 elisa试剂盒 蛋白提取试剂盒 外泌体试剂盒 质粒抽提试剂盒 抗体 一抗 二抗 联系方式 手机:400-1016-218 Q Q:355185756 邮箱:355185756@qq.com 地址:安徽省合肥市高新区黄山路602号合肥国家大学科技园A401室Anti ...
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采用定量pcr方法对gpr120和egfp的基因表达进行检测。在八连管中依次加入6μldh2o,2μl模板cdna,2μlfas引物,10μlsybrpremixextaqii(2x),总反应体系为20μl,混匀。 反应条件是:第一步是94℃、5min,第二步是94℃、30s,56℃、30s,72℃、1min循环进行40次,第三步是加温溶解扩增产物,获得溶解曲线。