优点:mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株可以稳定持续的表达mRFP-EGFP-LC3,能够有效地解决瞬转实验的效率低、周期长、操作繁琐、不稳定等问题,有利于保证实验结果稳定性与可重复性。mRFP-GFP-LC3 双荧光自噬指示体系的出现,把自噬研究带入了一个新的阶段,自噬不再只是指标,而是一种机制,自噬流的顺畅与否,对于细胞生理功能的...
mRFP-EGFP-..mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株构建服务质粒来源:Addgene # 21074 ( 载体pEGFP-C1+mRFP;插入基因 Rat LC3B,GenBank ID: U05784 )背景:自噬
mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株构建服务 价格:8,000元 地址:上海 查看商家电话 服务描述 服务简介 质粒来源:Addgene # 21074 (载体pEGFP-C1+mRFP;插入基因Rat LC3B,GenBank ID: U05784 ) 背景:自噬为机体在亚细胞水平的“自我吞噬”,可以帮助细胞维持自身稳态及适应应激环境。近年来,自噬已成为生物学领域中的一个...
EGFP-LC3稳转细胞株构建服务,EGFP-LC3稳转细胞株构建服务质粒来源:Addgene #11546 ( 载体pEGFP-C3; 插入基因 human LC3B,NM_022818 )背景:自噬为机体在亚细胞水平的“自我吞噬”,可以帮助细胞维持自身稳态及适应应激环境。近年来
自噬是指细胞自身将细胞质蛋白或细胞器经溶酶体降解的一种过程.微管相关蛋白1轻链3(LC3)是自噬的标志蛋白,利用荧光显微镜观察EGFP-LC3荧光蛋白是否聚集成点状是检测自噬的方法之一.首先构建了表达EGFP-LC3蛋白的真核表达质粒,其具有荧光和药物筛选双标签.转染到HeLa细胞中,利用药物初步筛选后,再稀释到96孔板中筛选出有...
EGFP-mRFP-LC3稳转细胞株构建服务 mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株构建服务 质粒来源：Addgene # 21074 ( 载体pEGFP-C1+mRFP；插入基因 Rat LC3B，GenBank ID: U05784 )背景：自噬为机体在亚细胞水平的“自我吞噬”，可以帮助细胞维持自身稳态及适应应激环境。近年来，自噬已成为生物学领域中的一个研究热点。迄今研究发现...
细胞自噬的机体重要的一种代谢过程,为了更好地研究不同条件下细胞自噬的水平,构建自噬检测质粒pLVX-mR-FP-EGFP-LC3.使用Trizol法提取Hela细胞总RNA,PCR技术特异性扩增LC3基因,将目的片段插入pEGFP-N3载体中.再将mRFP片段插入到EGFP-LC3质粒中,利用PCR技术扩增带有不同酶切位点的mRFP-EGFP-LC3片段,插入到慢病毒载体...
结论 :双荧光 mRFP—eGFP.LC3 体系优于单荧光 GFP—LC3 体系 ,更能全 面完整地反 映细胞 自噬水 平 ,能够反 映细胞 内 自噬流的变化 ,是 自噬定量分析 的可靠方法 。 [ 关键词] 雷帕霉素;自噬;人胚肾细胞;LC3;单荧光 GFP.LC3质粒;双荧光mRFP—eGFP—LC3 [ 中图分类号] R34—33 [ 文献标识码] ...
稳定表达EGFP-LC3蛋白的HeLa细胞系的构建
目的:探讨双荧光mRFP-eGFP-LC3(ptfLC3)体系在细胞自噬中的作用.方法:采用不同浓度雷帕霉素(50,100,200,500,1 000 nmol/L)处理人胚肾细胞(HEK293),蛋白印迹法检测不同浓度雷帕霉素组中自噬标记蛋白(LC3蛋白)的表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值;单荧光GFP-LC3质粒和双荧光mRFP-eGFP-LC3质粒转染HEK293细胞,雷帕霉素...