综上所述,虽然BrdU和EdU都是有效的细胞增殖检测方法,但EdU检测法因其操作简便、高灵敏度的优势,正在逐渐取代BrdU法,成为更优选的检测手段。 (2)将处于细胞周期不同阶段的细胞混合培养于多孔培养板中,各孔同时加入EdU,随后每隔一定时...
EdU 是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖过程中被细胞摄入并整合到 DNA 中。与传统的 BrdU 检测方法相比,EdU 法具有更高的灵敏度和更快的检测速度。EdU 上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针(如 FITC Azide、AF 系列染料等)在一价铜离子的催化下,发生点击反应(Click reaction),形成稳定的三...
BrdU与EdU都是___类似物,能够在细胞增殖时期(S期)代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子,通过与荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测标记物便能准确地反映细胞在注射BrdU或EdU期间进入S期细胞的总和。但BrdU需要与抗体结合才能进行标记,DNA变性后才能与抗体结合,这就破坏了DNA双链结构,影响了其他抗体的结合...
EdU原理跟BrdU检测法类似,都是代替胸腺嘧啶(Thymine, T)渗入正在复制的DNA中,并加入能与Edu反应的荧光染料,即可利用检测荧光值侦测应用于细胞增殖,或在细胞组织级别作为标记追踪等研究,实验过程不需要经过BrdU检测法的DNA变性处理。图2.EdU检测原理 实验操作 BrdU实验所需试剂:主要试剂:BrdU染料,BrdU单抗(一...
荧光染料可以同EdU发生“Click”化学反应(点击法),从而将增殖的细胞标记上荧光。可用于细胞成像、流式、细胞示踪、DNA损伤修复检测、线粒体活性检测以及病毒增殖活性检测等,EdU亦适用于活体注射,稳定,对活体无副作用。 与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,EdU检测法更简单、更快速、更准确,不需要严格的样品变性...
01.BrdU法 BrdU(Bromo-deoxyuridine)法,是在DNA复制过程中,由BrdU代替胸腺嘧啶核苷结合至DNA链,再通过带有标记的BrdU抗体,与DNA链上的BrdU发生抗原抗体反应,通过检测BrdU上的标记信号判断细胞增殖状态的方法。02 EdU法 EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),是胸腺嘧啶脱氧核苷类似物,在DNA合成过程中,它可替代胸腺...
Zeng等【4】用EdU标记法检测成体动物神经系统的细胞增殖, 并与传统的BrdU标记方法相对照, 充分肯定了EdU用于检测细胞增殖的可行性。 EdU对植物增殖细胞进行标记并检测 在植物细胞培养中, Kotogány等[5] 通过用EdU标记植物细胞(玉米、水稻、拟南芥等)进行实验, 相对于3H-TdR和BrdU,EdU检测植物细胞增殖不需要进行...
通过点击反应,新合成的DNA会被相应的荧光探针所标记,此时,可以使用荧光检测设备,检测细胞增殖状况。 EdU法 相较于BrdU法,EdU法具有明显的优势: 由于存在空间位阻,BrdU法的大分子抗体很难与DNA链上的BrdU结合。为了使大分子的BrdU抗体与DNA上的BrdU结合,需要对双链DNA进行变性处理(如酸变性、热变性或者DNase消化等)...
使用高特异性抗 BrdU 抗体时,BrdU 标记技术可以与点击化学检测法组合用于使用 EdU 的双脉冲标记简化方法。对于双脉冲应用,使用 EdU 作为核苷类似物之一大幅度简化该方法,原因是 Click-iT 叠氮化物检测试剂与掺入的 BrdU 之间无反应性。此外,几种抗 BrdU 抗体(...