实验步骤:一、荧光成像法 1、取对数生长期细胞,接种于96孔板中 2、标记细胞①制备EdU培养基②加入EdU培养基孵育,弃培养基③PBS清洗细胞3、固定细胞①加入细胞固定液(预冷的4%多聚甲醛)室温孵育30分钟,弃固定液②加入甘氨酸,脱色摇床孵育5分钟后,弃甘氨酸溶液③加入PBS,脱色摇床清洗5分钟,弃PBS④加入渗透...
操作步骤: (1)用细胞完全培养基按1000:1的比例稀释EdU溶液(试剂 A),制备适量 50 μmol/L EdU培养基; (2)每孔加入100 μL 50 μmol/L EdU培养基孵育2~8 h,弃培养基;DPCs周期相对较长,一般孵育8 h,HFSCs周期相对较短,孵育2~5 h均可; (3)PBS清洗细胞1~2次,每次5 min; (4)每孔加入50 μL ...
1、细胞培养 (1)细胞均匀种在6孔板里; (2)待细胞密度长到60-90%时,转染相应核酸; (3)转染后24小时,用胰蛋白酶把6孔板里的细胞消化下来,接种于48孔板中(每个样3个重复),培养至密度70%-90%; 2、EdU标记 (1)用细胞培养液按1000:1的比例稀释EdU溶液 (试剂A),制备适量50 μM EdU培养基; EdU培养基及...
10.编写实验报告:根据实验过程和结果,撰写实验报告。报告中应包括实验的背景、目的和问题、实验方法和步骤、数据收集和分析、结果讨论等内容。报告要清晰、准确地呈现实验的过程和结果,以便其他人可以复现实验并进行进一步的研究。 以上是一个典型的EDU实验步骤,实验的具体步骤和过程会根据实验的目的和要求而有所调整。
3.3 EdU检测实验步骤 EdU 标记: (1)用细胞完全培养基按比例稀释EdU溶液,制备适量2×EdU 工作液,终浓度为50μM; (2)每孔加入37°水浴的 EdU 工作液液500μL和500μL培养基(1比1),混合均匀后于培养箱孵育6-7小时(可根据细胞增殖速度,适当调整孵育时间),使EdU终浓度为50 μM ; (3)弃孵育培养基,PBS...
注:如果您有采用BrdU进行实验的经验,可以参照BrdU实验的相关参数进行EdU实验。 细胞固定化 2.1每孔加入50μL细胞固定液(即含4%多聚甲醛的PBS)室温孵育30分钟,弃固定液; 注:1)低浓度的多聚甲醛有利于细胞结构的保持,当需要抗体染色时,需采用Triton X-100透化细胞以利于抗体进入细胞内。
EDU实验步骤范文EDU实验步骤范文 1.确定实验目的: 在开始实验之前,需要明确实验目的。实验目的可以是验证一个理论,观察一个现象,或者解决一个问题。明确实验目的能够指导实验的进行和结果的分析。 2.收集背景资料: 在进行实验之前,需要进行一些背景研究,以了解关于实验主题的基本知识。收集背景资料有助于理解实验的理论...
注:如果您有采用BrdU进行实验的经验,可以参照BrdU实验的相关参数进行EdU实验。 细胞固定化 2.1每孔加入50μL细胞固定液(即含4%多聚甲醛的PBS)室温孵育30分钟,弃固定液; 注:1)低浓度的多聚甲醛有利于细胞结构的保持,当需要抗体染色时,需采用Triton X-100透化细胞以利于抗体进入细胞内。
实验步骤 A.EdU标记培养细胞 本实验以96孔板培养的贴壁细胞为例。悬浮细胞可在孵育EdU后进行涂片处理(将适量细胞滴加到载玻片上,酒精灯烘烤至干燥),涂片后从固定开始与贴壁细胞采用相同的染色步骤。 1.孔板内放入适配盖玻片,接种适量细胞,使其生长至所需密度后处理细胞; ...
实验步骤 星级: 54 页 EDU实验步骤 下载积分:800 内容提示: EdU 细胞增殖(细胞成像) EdU 是一种胸腺嘧啶核苷类似物, 其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见, 能够在 DNA 复制时期代替胸腺嘧啶(T) 渗入正在合成的 DNA 分子中, 通过基于 Apollo®荧光染料与 EdU 的特异性反应即可直接并准确地检测出 DNA...