实验步骤:一、荧光成像法 1、取对数生长期细胞,接种于96孔板中 2、标记细胞①制备EdU培养基②加入EdU培养基孵育,弃培养基③PBS清洗细胞3、固定细胞①加入细胞固定液(预冷的4%多聚甲醛)室温孵育30分钟,弃固定液②加入甘氨酸,脱色摇床孵育5分钟后,弃甘氨酸溶液③加入PBS,脱色摇床清洗5分钟,弃PBS④加入渗透
操作步骤: (1)用细胞完全培养基按 1000:1的比例稀释EdU溶液(试剂 A),制备适量 50 μmol/L EdU培养基; (2)每孔加入100 μL 50 μmol/L EdU培养基孵育2~8 h,弃培养基;DPCs周期相对较长,一般孵育8 h,HFSCs周期相对较短,孵育2~5 h均可; (3)PBS清洗细胞1~2次,每次5 min; (4)每孔加入50 μL ...
EdU需单独购买;2. 可选步骤:阴性对照的设置:EdU处理时加入DNA合成抑制剂Hydroxyurea,按1000 mg/kg的浓度用EdU溶液进行配制。Hydroxyurea需单独购买;3. 24小时后或根据特定实验确定的适当时间后,快速处死小鼠,取出所需的组织,按照常规步骤制作冰冻切片或石蜡切片。EdU标记的时间也可以参考相关文献自行调整;4. 对...
3.3 EdU检测实验步骤 EdU 标记: (1)用细胞完全培养基按比例稀释EdU溶液,制备适量2×EdU 工作液,终浓度为50μM; (2)每孔加入37°水浴的 EdU 工作液液500μL和500μL培养基(1比1),混合均匀后于培养箱孵育6-7小时(可根据细胞增殖速度,适当调整孵育时间),使EdU终浓度为50 μM ; (3)弃孵育培养基,PBS...
接下来我们以一种常用的EdU检测试剂盒为例,介绍一下实验步骤。 1、细胞培养 (1)细胞均匀种在6孔板里; (2)待细胞密度长到60-90%时,转染相应核酸; (3)转染后24小时,用胰蛋白酶把6孔板里的细胞消化下来,接种于48孔板中(每个样3个重复),培养至密度70%-90%; ...
实验步骤 1.细胞处理:将传代至第3代的HepG2细胞按5×10^4/孔接种,待贴壁率达80%时,更换含EdU的培养液(终浓度10μM),置于37℃、5%CO2环境孵育2小时。2.标记终止:弃去培养液,用预冷PBS(含Ca²⁺/Mg²⁺)轻柔漂洗3次,每次2分钟。注意:漂洗过程需避光操作。3.细胞固定:加入4%多聚甲醛(...
10.编写实验报告:根据实验过程和结果,撰写实验报告。报告中应包括实验的背景、目的和问题、实验方法和步骤、数据收集和分析、结果讨论等内容。报告要清晰、准确地呈现实验的过程和结果,以便其他人可以复现实验并进行进一步的研究。 以上是一个典型的EDU实验步骤,实验的具体步骤和过程会根据实验的目的和要求而有所调整。
EDU实验步骤 EdU细胞增殖(细胞成像) 荧光显微镜检测方法(以96孔板,A549贴壁细胞为例) 细胞培养 ? 取对数生长期细胞,以每孔4×103~1×105细胞接种于96孔板中,培养至正常生长阶段。药物处理 ? (可选)客户可以根据实验需要进行各种药物处理。 EdU标记 ? 1.1 用细胞培养基按1000:1的比例稀释EdU溶液 (试剂A),制备...
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