选择读出方法的关键考虑因素是专用设备的可用性。荧光显微镜是 Duolink® PLA 实验最常用的读出设备。上述所有样品类型均可与荧光Duolink® PLA 试剂一起使用,不过,部分样品会表现出明显的自发荧光。如果发生这种情况或当荧光仪器不可用时,可用光学显微镜进行明场Duolink® PLA实验。流式细胞术方案对于仪器类型是...
洗涤缓冲液A应在开始测定之前制备,将一小袋内容物溶解在高纯度纯水中,定容1,000 mL。溶液可在室温短期(最长两周)储存或 4°C长期储存。说明:使用前将溶液升温至室温。许多Duolink® PLA试剂以浓缩原液形式提供,在使用前立即稀释。请勿储存稀释后的Duolink® PLA试剂。Duolink® PLA明场实验方案 在开始...
一、封闭 1.涡旋Duolink®封闭液。 2.在每个1cm2样品上添加1滴(~40 μL)Duolink®封闭液。确保封闭液要覆盖整个样品。 3.将载玻片置于加热湿度箱中37℃孵育60分钟。 二、孵育一抗在添加抗体之前请勿让载玻片干燥,否则会导致背景。 1.涡旋Duolink®抗体稀释剂。 2.在Duolink®抗体稀释剂中稀释一抗或...
一次完整的 Duolink®实验,需要以下试剂:两个一抗(识别目标蛋白)、一对PLA探针(根据一抗的生物来源进行选择)、检测试剂(明场或不同荧光基团标记)、封片剂、洗涤缓冲液。 Duolink®实验需要的细胞或组织的最小和最大样本量是多少? a)细胞样本:原则上,Duolink®需要...
选择读出方法的关键考虑因素是专用设备的可用性。荧光显微镜是Duolink® PLA实验常用的读出设备。上述所有样品类型均可与荧光Duolink® PLA试剂一起使用,不过,部分样品会表现出明显的自发荧光。如果发生这种情况或当荧光仪器不可用时,可用光学显微镜进行明场Duolink® PLA实验。
duolink pla荧光实验方案 Duolink PLA (Proximity Ligation Assay)是一种用于检测蛋白质互作的荧光实验技术。该技术使用特定的荧光标记探针来检测两个靠近的蛋白质分子之间的相互作用。 实验步骤如下: 1.细胞处理:首先,处理您要研究的细胞。您可以使用适用于您研究的细胞类型的特定处理方法。这可能包括对细胞进行激活...
3. Duolink PLA实验操作 9.清洗载玻片:使用洗涤缓冲液洗涤载玻片,去除非特异性结合和杂质。 10.阻断非特异性结合:将阻断剂加入载玻片中,阻断非特异性结合位点。 11.加入第一对抗体:将第一对用于检测相互作用的抗体加入载玻片中,与目标蛋白质发生特异性结合。 12.加入双抗体:加入连接两个抗体的双抗体,形成连接...
我们建议在Duolink In Situ荧光用户手册的第7.3节第5步完成扩增步骤后进行复染操作。以下实验方法以使用直接标记的FITC抗α微管蛋白抗体进行复染为例:全部方案请到默克官网查看:www.sigmaaldrich.cn 在室温下进行以下步骤。将扩增-聚合物溶液从玻片上移去。用1x 洗涤缓冲液B洗涤玻片2 x 10 min。将玻片移至1x...
Duolink®PLA试剂有关具体的产品建议,请参阅Duolink®PLA产品选择指南。简单来说,要运行用于荧光检测的Duolink®PLP实验,需要以下Duolink®PLA产品:一、Duolink®PLA探针(一种PLUS和一种来自不同物种的MINUS,与您的
西格玛奥德里奇官网:Duolink In Situ后复染实验指南在深入理解Duolink In Situ荧光技术的高效利用时,复染步骤至关重要。在用户手册的7.3节中,我们特别强调了第5步后的强化染色步骤。让我们以直接标记的FITC抗α微管蛋白抗体为例,探索这一过程的详细步骤:步骤一:准备</ 在室温下,首先确保从玻片上...