DTT是一种含有硫醇基团的有机小分子,具有较强的还原性。在蛋白提取和纯化的过程中,DTT能够有效地还原蛋白质中的二硫键,使得蛋白质的空间结构发生变化,进而有利于蛋白质的溶解和提取。同时,DTT还能够破坏蛋白质与其他分子之间的非共价键相互作用,如疏水作用、氢键和离
从使蛋⽩失去活性。所以,在蛋⽩纯化和保存时,在溶液中加⼊⼀定量的DTT,以免蛋⽩-SH被氧化⽽失活。但这⾥就有⼀个⽭盾,DTT该加多少量,以使-SH保持还原状态,⽽使⼆硫键免遭还原?除了上述作⽤,DTT还有哪些⽅⾯可以起到作⽤?我的知识⾯⾮常有限,请各位战友多多指教。
DTT在离子状态才有作用,在pH7-9.5的时候作用最强,pH降到3以下几无电离,因此可以通过降低pH至3以下来终止DTT作 现在才知道DTT作用还受到pH的影响。 提到尿素变性,要是蛋白存在分子间或分子内二硫键,即使具有高浓度的尿素或盐酸胍,而没有DTT等还原剂,那是否也不能使蛋白完全变性(断裂二硫键)? 我记得有篇“从...
[size=+0]我们知道Cys存在与许多蛋白中,且其中的-SH常作为活性中心发挥作用,或者,两个-SH连接成二硫键,是维持蛋白质高级构象重要桥梁。 -SH具有很强的还原性,溶液被溶液中的溶解氧或其它氧化物氧化,从使蛋白失去活性。 所以,在蛋白纯化和保存时,在溶液中加入一定量的DTT,以免蛋白-SH被氧化而失活。
DTT在蛋白纯化和保存中的作用 我们知道Cys存在与许多蛋白中,且其中的-SH常作为活性中心发挥作用,或者,两个-SH连接成二硫键,是维持蛋白质构象重要桥梁。-SH具有很强的还原性,溶液被溶液中的溶解氧或其它氧化物氧化,从使蛋白失去活性。所以,在蛋白纯化和保存时,在溶液中加入一定量的DTT,以免蛋白-SH被氧化而失活。
DTT在蛋白纯化和保存中的作用 我们知道Cys存在与许多蛋白中,且其中的-SH常作为活性中心发挥作用,或者,两个-SH连接成二硫键,是维持蛋白质构象重要桥梁。-SH具有很强的还原性,溶液被溶液中的溶解氧或其它氧化物氧化,从使蛋白失去活性。所以,在蛋白纯化和保存时,在溶液中加入一定量的DTT,以免蛋白-SH被氧化而失活。
我们知道Cys存在与许多蛋白中,且其中的-SH常作为活性中心发挥作用,或者,两个-SH连接成二硫键,是维持蛋白质高级构象重要桥梁。 -SH具有很强的还原性,溶液被溶液中的溶解氧或其它氧化物氧化,从使蛋白失去活性。 所以,在蛋白纯化和保存时,在溶液中加入一定量的DTT,以免蛋白-SH被氧化而失活。
所以,在蛋白纯化和保存时,在溶液中加入一定量的DTT,以免蛋白-SH被氧化而失活。但这里就有一个矛盾...
DTT是一种含有硫醇基团的有机小分子,具有较强的还原性。在蛋白提取和纯化的过程中,DTT能够有效地还原蛋白质中的二硫键,使得蛋白质的空间结构发生变化,进而有利于蛋白质的溶解和提取。同时,DTT还能够破坏蛋白质与其他分子之间的非共价键相互作用,如疏水作用、氢键和离