本视频展示了(DNA或RNA)斑点印记实验全过程。 出处:Bio-protocol第一届生物实验短视频大赛作者:北京大学,刘晨阳万物研究所 知识 科学科普 实验 Bio-protocol Dot Blot 印记 实验操作 斑点 万物研究所·2022第五期Bio-protocol 发消息 于2011年在斯坦福大学创建, 致力于搭建全球权威的、高质量的生物实验方案分享...
Dot blot是一种半定量的蛋白质或核酸检测方法,其原理是将待测物直接滴于固相载体上,然后通过特异性抗体或探针与待测物结合,最终通过可视化方法来检测目标分子的存在与否。以下是详细的实验步骤和注意事项: 实验原理 🧬 Dot blot法主要用于鉴定分泌型蛋白的表达。通过将样品直接点样在PVDF膜上,然后与特异性抗体结合...
1.将已知浓度的样本样品，用无酶离心管进行梯度稀释（并上操作）2.短暂离心，然后将RNA样品95℃加热3分钟，结束后迅速转到冰上冷却，防止重新形成二级结构。3.用1ml枪头粗端在NC膜上留下圆形印痕并用铅笔描圈，以引导加样，并将 NC膜裁剪成合适的尺寸，转移至干净的培养皿中。4.取2μl RNA样品按顺序滴在NC...
1,RNA待测样本(注:本人用的是直接提取的RNA,为了实验更严谨,应当先进行mRNA纯化) 2,无酶水 3,TBST(1×TBS, 0.1%Tween-20) 4,封闭液 5,一抗 6,二抗 7,ECL显影液 8,亚甲蓝染色缓冲液(0.4M醋酸钠、0.4M醋酸中的0.2%亚甲蓝) 二,实验设备 无酶EP管 加热设备 NC膜 或 带正电荷的尼龙膜(建议使用尼...
Dot blot斑点杂交实验可分为DNA、RNA和完整细胞的斑点杂交三类,三种方法各有不同。 1、DNA斑点杂交方法介绍 (1)先将膜在水中浸湿,再放到15×SSC中。 (2)将DNA样品溶于水或TE,煮沸5 min,冰中速冷。 (3)用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。
1. 基本原理:Dot Blot实验在膜上直接滴点分析样品中是否存在特定蛋白质,而Western Blot实验先通过SDS-PAGE将样品中的蛋白质进行分 离,再根据特异性抗体来检测某个具体的蛋白质。 2. 操作难度:相比较Western Blot, Dot Blot相对容易进行,缩短了实验周期和操作时间。
一、实验材料 1. RNA待测样本（建议先进行mRNA纯化）2. 无酶水 3. TBST（1×TBS， 0.1%Tween-20）4. 封闭液 5. 一抗 6. 二抗 7. ECL显影液 8. 亚甲蓝染色缓冲液（0.4M醋酸钠、0.4M醋酸中的0.2%亚甲蓝）二、实验设备 无酶EP管 加热设备 NC膜 或 带正电荷的尼龙膜（建议使用尼龙...
离心柱法提取细胞DNA进行dot blot实验, 视频播放量 2995、弹幕量 0、点赞数 61、投硬币枚数 23、收藏人数 119、转发人数 38, 视频作者 卟卟步步, 作者简介 医学狗～,相关视频:PCR 操作步骤1——提取DNA(1)【DNA Extraction Part 1】,Worth 4 dot检查,硅胶膜离心柱法核
dot blot实验求助 我正在寻求各位专家的帮助，关于我做的这个dot blot实验。在第一张图片中，可以看到PVDF膜在样品干燥后，周围出现了晕染的痕迹。第二张是成像仪拍摄的图片。我遇到了几个问题：首先，标准曲线列的点边缘有深色的印记；其次，样品点周围也出现了晕染。这究竟是什么原因造成的呢？我使用的是PVDF膜，...
如题，在dot-blot实验中抗体A11和6E10有什么区别？为什么有的文献中dot-blot实验要用两种抗体，甚至更多...