Dot blot是一种半定量的蛋白质或核酸检测方法,其原理是将待测物直接滴于固相载体上,然后通过特异性抗体或探针与待测物结合,最终通过可视化方法来检测目标分子的存在与否。以下是详细的实验步骤和注意事项: 实验原理 🧬 Dot blot法主要用于鉴定分泌型蛋白的表达。通过将样品直接点样在PVDF膜上,然后与特异性抗体结合...
RNA dot blot实验流程 一、实验材料 1,RNA待测样本(注:本人用的是直接提取的RNA,为了实验更严谨,应当先进行mRNA纯化) 2,无酶水 3,TBST(1×TBS, 0.1%Tween-20) 4,封闭液 5,一抗 6,二抗 7,ECL显影液 8,亚甲蓝染色缓冲液(0.4M醋酸钠、0.4M醋酸中的0.2%亚甲蓝) 二,实验设备 无酶EP管 加热设备 NC...
Dot Blot斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。 Dot blot斑点杂交实验介绍由普拉特泽生物分子检测品台总结分享,分子检测平台为广大科研实验人员提供dot b...
下面是Dot Blot实验的操作步骤: 1. 制备膜:选择合适的膜,并根据实验要求进行处理,常用的有氮化纤维素(NC)膜、聚乙烯哈什表(PEI)膜等。 2. 准备样品:将待测蛋白质稀释至更低的浓度,以减少杂交信号的产生。 3. 准备滴点:使用微量吸管或移液器,在膜上制作滴点。 4. 加样品:在膜上制作一系列滴点,并分别加入...
RNA Dot blot 实验流程 1.将已知浓度的样本样品，用无酶离心管进行梯度稀释（并上操作）2.短暂离心，然后将RNA样品95℃加热3分钟，结束后迅速转到冰上冷却，防止重新形成二级结构。3.用1ml枪头粗端在NC膜上留下圆形印痕并用铅笔描圈，以引导加样，并将 NC膜裁剪成合适的尺寸，转移至干净的培养皿中。4.取2...
一、实验材料 1. RNA待测样本（建议先进行mRNA纯化）2. 无酶水 3. TBST（1×TBS， 0.1%Tween-20）4. 封闭液 5. 一抗 6. 二抗 7. ECL显影液 8. 亚甲蓝染色缓冲液（0.4M醋酸钠、0.4M醋酸中的0.2%亚甲蓝）二、实验设备 无酶EP管 加热设备 NC膜 或 带正电荷的尼龙膜（建议使用尼龙...
离心柱法提取细胞DNA进行dot blot实验, 视频播放量 2995、弹幕量 0、点赞数 61、投硬币枚数 23、收藏人数 119、转发人数 38, 视频作者 卟卟步步, 作者简介 医学狗～,相关视频:PCR 操作步骤1——提取DNA(1)【DNA Extraction Part 1】,Worth 4 dot检查,硅胶膜离心柱法核
dot blot实验求助 我正在寻求各位专家的帮助，关于我做的这个dot blot实验。在第一张图片中，可以看到PVDF膜在样品干燥后，周围出现了晕染的痕迹。第二张是成像仪拍摄的图片。我遇到了几个问题：首先，标准曲线列的点边缘有深色的印记；其次，样品点周围也出现了晕染。这究竟是什么原因造成的呢？我使用的是PVDF膜，...
根据Abcam官网提供的RNA dot bloting protocol,进行实验在实验过程中适当更改实验条件,形成实验笔记。 RNA dot blot 一、试剂 RNA样本 无RNase水 TBST(1x TBS,0.1% Tween-20) 封闭液一抗 二抗(山羊抗兔 IgG-HRP, ab97051, 或山羊抗小鼠 IgG-HRP)
如题，在dot-blot实验中抗体A11和6E10有什么区别？为什么有的文献中dot-blot实验要用两种抗体，甚至更多...