荧光试剂DNS-Cl在碱性条件下可与蛋白质或多肽的N-端氨基结合生成DNS-蛋白质或DNS-多肽,再经酸水解可释放出DNS-氨基酸,在紫外光照射下,产生强烈的黄色荧光,可用聚酰胺薄膜层析进行鉴定。 其反应式如下: DNS-C1与蛋白质的侧链基团巯基、咪唑基、...
末端的氨基反应,分别生成有荧光标记荧光标记的DNS-氨基酸(多肽、蛋白质),可在紫外光照射下发出可见的荧光。灵敏度10-10摩尔。DNSClNDNSDNSN 用DNS-Cl标记胰岛素两条肽链的N末端(A链N末端是Gly,B链N末端是Phe) DNS-胰岛素在6.0mol/L的盐酸中水解,释放出带有DNS荧光标记的DNS-Gly和DNS-Phe。(其他的氨基酸残基...
DNS—氨基酸在360nm 或280nm 波长的紫外光照射下,发出黄色荧光,很方便进行检测。 蛋白质和多肽经酸水解后,肽键断裂,生成游离氨基酸,所有氨基酸都能与DNS—Cl 反应。所以DNS—Cl 法可用于蛋白质或多肽氨基酸组成的微量分析。 在pH 值过高的情况下,DNS—Cl 会发生水解生成副产物DNS—NH2,DNS—OH 和DNS—Cl在紫外...
1、DNS法分析蛋白质末端氨基酸,一、实验目的 学习用DNS法分析蛋白质及肽的N-末端,掌握聚酰胺薄膜层析法的实际操作,二、原理 蛋白质N-末端氨基酸的2-氨基与荧光试剂DNS-Cl(二甲氨基萘磺酰氯)反应后得到Dansyl-蛋白质(二甲氨基萘-5磺氨酰蛋白),经酸水解,得到Dansyl-氨基酸和各种游离氨基酸。DNS-氨基酸在波长254nm...
实验一氨基酸聚酰胺薄膜层析DNS-C1法13生物基地201300140059刘洋2015-03-24同组者:张奕一、实验目的1.了解并掌握DNS<基酸的制备和鉴定。2.掌握制备Dansyl氨呈酸和聚酰胺薄膜层析法的操作和方法。二、实验原理荧光试剂5•二甲氨基亠蔡碱酰氯(dansyl-CI,简称DNS-CI)在弱碱性条件(pH9.0左右下与氨基酸(肽或蛋白质)...
摘要:为了建立一种荧光衍生试剂丹磺酰氯DNS-Cl对含氮药物进行荧光标记与分析的方法,进行了DNS-Cl对一系列含氮物质的荧光衍生反应。通过紫外、荧光等光学检测手段分析荧光标记产物的光学性质,以间隔取样监测标记产物荧光强度随时间的稳定性,进行体外活细胞环境的细胞毒性评价与细胞荧光成像标记,评价荧光衍生产物在活细胞环境...
通过蛋白质与DNS-Cl(二硝基硫脲氯化物)反应,生成DNS-蛋白质。DNS-蛋白质是通过在N-末端氨基酸残基上标记DNS(二硝基萘基)基团而得到的。对DNS-蛋白质进行水解和薄层层析,可以确定该蛋白质中所含的氨基酸种类和数量。这种方法相对简便且适用,被广泛用于蛋白质的氨基酸组成分析。
dns-cl法分离氨基酸调ph会产生反应。根据查询相关公开信息得知DNS-Cl在pH过高时,水解产生副产物。可通过ph分离氨基酸。
又由于DNS-Cl主要与α-氨基反应,由此可判断最上方的少量黄绿色荧光的是Lys的δ-氨基反应后的DNS-Lys。 查阅资料得到以下几条结论: 1. DNS-丙氨酸的相对分子质量体积最小,非极性最强,形成氢键最弱,展层速度最快,因而在最上方;而Lys由于与聚酰胺表面形成2个氢键,极性强,所以展层速度慢;Phe的极性处于两者之间,...