三、RNA pull-down实验原理 RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过western blot实验检测特定的RNA结合蛋白...
Yu et al. (2006) developed a method based on support vector machines for discriminating DNA- and RNA-binding proteins from other globular proteins. Yan et al. (2006) used Naive Bayes classifier and the information about the binding site residue and four neighboring residues on both sides of ...
从而调控生物个体的发育过程,疾病发生和环境应答等生命活动;circRNA是一类不具有5`cap和3`ployA,以共价键形成环形结构的ncRNA分子,部分circRNA含有miRNA应答元件,可充当竞争性内源RNA(competing endogenousRNA,ceRNA),在胞浆中以类似海绵一样吸附miRNA,进而解除miRNA对其靶基因的抑制作用,从而调节基因的表达。
第一类是酶特异性DNA-蛋白质共价结合体,这些是多种核酶(例如拓扑异构酶(topoisomerases)、酪氨酸DNA磷酸二酯酶I (tyrosyl-DNA phosphodiesterase I, or TDP1), DNA和RNA聚合酶以及HMCES等)的正常酶催化中间体。但在酶功能失调、内源性DNA损伤暴露或...
DNA/RNA/Protein提取试剂盒品牌 编号:WK126 规格:50次 品牌:百奥莱博 产品介绍: 本试剂盒适用于从同一细胞或组织样本中同时分离纯化基因组DNA、总RNA和总蛋白。本产品无需将样品分为3份来分别提取DNA,RNA和蛋白质,也无需先将纯化后的总核酸分为两份后再分别纯化DNA和RNA,因此可*限度的回收DNA,RNA和蛋白质,...
1.RNA pull-down实验技术流程 (1)目标RNA的制备及生物素标记。 目标RNA制备的一般流程包括: 构建RNA过表达质粒:基因合成+测序验证 体外转录模板准备:设计含T7启动子引物;PCR扩增得到转录模板 体外转录:以PCR产物为模板,体外转录得到...
1.RNA pull-down实验技术流程 (1)目标RNA的制备及生物素标记。 目标RNA制备的一般流程包括: 构建RNA过表达质粒:基因合成+测序验证 体外转录模板准备:设计含T7启动子引物;PCR扩增得到转录模板 体外转录:以PCR产物为模板,体外转录得到目的RNA (2)磁珠富集RNA ...
In addition to amplifying pieces of DNA for later manipulation or use, a slight modification of standard PCR methods allows quantitative comparisons of the amount of DNA or RNA present in a sample. A very sensitive method that requires only a tiny amount of either DNA or RNA template, quantita...
/引发酶复合物首先,合成RNA引物;其次,利用DNA聚合酶活性将引物延伸,产生起始DNA(initiatorDNA,iDNA)短序列,形成RNA-DNA引物;最后,Pol /引发酶脱离模板链DNA,发生DNA聚合酶转换(switch)。结构: p70、p34和p11组成异源三聚体功能: 2.RPA的功能与E.coli的SSB相似复制蛋白A(replicationproteinA,RPA)结合单链DNA促使双...
sequence that is produced, with the exception of U replacing T. Since the RNA sequence is the sequence that we use to determine whatare produced through mRNA, this DNA strand is also called sense strand, (+) strand, or nontemplate strand (Fig. 3.1). ...