细胞凋亡检测实验——DNA ladder法 实验方法原理 发生细胞凋亡时,内源性核酸酶被激活,染色体DNA链在核小体之间被切割,形成180～200个碱基或其整数倍的DNA片段,将这些DNA片段抽提出来进行电泳,可得到DNA梯状条带(DNA ladder)。 实验材料 凋亡细胞 试剂、试剂盒 蛋白酶K醋酸钾白细胞裂解液Tris-HClNaClEDTASDS乙醇琼...
实验所用核苷酸序列(序列见表1)及dNTPs(dATP,dTTP,dGTP,dCTP)均购自大连Takara生物技术公司(序列见表1),保存在-20 ℃;phi29 DNA聚合酶,购买于Thermo Fisher Scientific,保存于-20 ℃;琼脂糖、TAE缓冲溶液、6 ×上样缓冲液和DNA标准条带(DNA Ladder,0.2-10 kb, 21 bands)均购买于碧云天生物技术。本文中用水...
DNA ladder法检测细胞凋亡的方法 以下是DNA Ladder法检测细胞凋亡的具体步骤: 1. 材料和试剂准备 细胞样本(凋亡诱导或对照) 裂解缓冲液(含有蛋白酶抑制剂的缓冲液,通常含有Tris-HCl等) 蛋白酶K RNase A 异丙醇 乙醇(70%) TE缓冲液(10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA) 琼脂糖凝胶和电泳设备 溴化乙锭(EtBr)或其他D...
1、实验简介：DNA ladder掺入回收实验 凡知医学作为专业的提取试剂品牌专门针对血浆游离提取片段进行了研究。在大量DNA ladder掺入回收实验后，发现不同提取试剂盒对不同片段大小的提取敏感度存在明显差异。Qsep片段分析示例：凡知医疗试剂盒 竞品试剂盒 2、实验结果分析 （1）凡知试剂盒可良好回收不同片段大小的D...
DNA_ladder实验步骤1.105-107个细胞0.5ml胰酶消化后,转入2.0ml离心管,加冰冷的PBS至1.5ml,1600rpm离心5min,弃上清,收集细胞。 2.细胞重悬于1ml冰冷的PBS,转入1.5ml离心管。1600rpm离心5min,漂洗2次,离心收集。 3.加入0.5ml含100ug/ml蛋白酶K和20ug/ml RNase A的DNA提取缓冲液(蛋白酶K和RNase A用前加),...
发生细胞凋亡时,内源性核酸酶被激活,染色体DNA链在核小体之间被切割,形成180～200个碱基或其整数倍的DNA片段,将这些DNA片段抽提出来进行电泳,可得到DNA梯状条带(DNA ladder)。 一、材料与试剂准备 1. 材料:凋亡细胞。 2. 蛋白酶K(500 μg/ml), 醋酸钾氯仿(8 mol/L),无水乙醇,70%乙醇,2%琼脂糖凝胶。
DNA ladder实验步骤 1.105-107个细胞0.5ml 胰酶消化后，转入2.0ml离心管，加冰冷的PBS至1.5ml，1600rpm离心5min，弃上清，收集细胞。2.细胞重悬于1ml冰冷的PBS，转入1.5ml离心管。1600rpm离心5min，漂洗2次，离心收集。3.加入0.5ml含100ug/ml蛋白酶K和20ug/ml RNase A的DNA提取缓冲液（蛋白酶K和RNase ...
DNA_ladder实验步骤 1.105-107个细胞0.5ml 胰酶消化后，转入2.0ml离心管，加冰冷的PBS至1.5ml，1600rpm离心5min，弃上清，收集细胞。2.细胞重悬于1ml冰冷的PBS，转入1.5ml离心管。1600rpm离心5min，漂洗2次，离心收集。3.加入0.5ml含100ug/ml蛋白酶K和20ug/ml RNase A的DNA提取缓冲液（蛋白酶K和RNase ...
图 3. 第二条泳道（从左起）是 DNA ladder。 基于它，可以估计在泳道 1、3 和 4（左起）上运行的片段的大小。确认 DNA 片段的精确分子量对于许多实验程序至关重要，例如分子克隆。在克隆感兴趣的 DNA 片段之前，有必要通过在凝胶中运行样品来确认其大小。聚合酶链反应 (PCR) 产物的评估也使用琼脂糖凝胶...
dnaladder蛋白酶步骤rnase抽提 蛋白酶K法提贴壁细胞DNA1.105-107个细胞0.5ml胰酶消化后,转入2.0ml离心管,加冰冷的PBS至1.5ml,1600rpm离心5min,弃上清,收集细胞。2.细胞重悬于1ml冰冷的PBS,转入1.5ml离心管。1600rpm离心5min,漂洗2次,离心收集。3.加入0.5ml含100ug/ml蛋白酶K和20ug/mlRNaseA的DNA提取缓冲液(蛋...