DNA甲基化:是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CPG二核苷酸的胞嘧啶5’碳位共价键结合一个甲基基因。其主要形式为5-甲基胞嘧啶(5-mC.、少量的N6-甲基嘌呤(N6-mA.及7-甲基鸟嘌呤(7-mG)。 DNA甲基化的检测方法: (1)重亚硫酸盐(亚硫酸氢盐)修饰:未甲基化的胞嘧啶转化成尿嘧啶;甲基化的胞嘧啶不发生...
而主动DNA去甲基化是指在去甲基化酶的作用下移去甲基基团来消除DNA甲基化。去甲基化酶可以将整个甲基化胞嘧啶碱基从DNA骨架上移除,随后通过碱基切除修复途径用未甲基化的胞嘧啶填充产生的单核苷酸缺口。在对哺乳动物主动去甲基化的研究中发现,双加氧酶TET(ten-eleven translocation)能将5 mC氧化为5-羟甲基胞嘧啶(5...
也是DNA甲基化研究中经典方法了,通过bisulfite 处理,将没有甲基化修饰的胞嘧啶转化为尿嘧啶,通过后续检测,可以获得每个胞嘧啶位点上的甲基化修饰的百分比。它不局限于CpG位点,同样适用于含有non-CG甲基化的植物和真菌样品的研究。不过bisulfite处理的转换效率非常重要,目前商业化的bisulfite kit的转化效率都可以达到99%以上。
根据样品的处理方法,可分为: bisulfite处理 DNA 甲基化位点富集处理 限制性内切酶处理 1.Bisulfite(重亚硫酸盐)处理: 也是DNA甲基化研究中经典方法了,通过bisulfite 处理,将没有甲基化修饰的胞嘧啶转化为尿嘧啶,通过后续检测,可以获得每个胞嘧啶位点上的甲基化修饰的百分比。它不局限于CpG位点,同样适用于含有non-CG甲...
Global DNA methylation 检测方法 质谱法 作为整体甲基化检测的“金标准”，可检测到0.25%的甲基化差异，具有精确性高、重复性好、样品需求量少等优点，但操作要求严格。ELISA法 简单快速，高通量检测方法，通过将DNA片段化后结合在96孔板上，用anti-5mC抗体检测5mC修饰，通过HRP的二抗进行识别显色。
《DNA甲基化检测的电化学生物传感新方法研究》是依托湖南大学，由楚霞担任项目负责人的面上项目。中文摘要 基因组甲基化是指在甲基转化酶催化下，基因组DNA序列中胞嘧啶－鸟嘌呤二核苷酸（CpG）的胞嘧啶环5位碳原子被甲基化形成5-甲基胞嘧啶（5mC）的现象。人类的许多重大疾病如癌症、遗传性疾病都与基因组甲基化...
《全基因组DNA甲基化研究中的统计学方法》是依托复旦大学，由张洪担任项目负责人的面上项目。项目摘要 本项目致力于解决全基因组DNA甲基化研究中的一些重要统计学问题。DNA甲基化模式异常是环境与基因交互作用的结果，它是包括癌症在内的很多疾病之先兆，也跟疾病预后有密切关系，因此与疾病相关的DNA甲基化标记可用于...
我在做小鼠某基因在不同季节的甲基化状态的比较，想询问一下用什么方法比较好？