1. 除了于65℃在杂交液Ⅰ中温育的条件外,预杂交按甲酰胺法进行。 2. 按甲酰胺法制备探针并用2 ml 杂交液Ⅰ稀释。 3. 滤膜在65℃杂交过夜,然后移去杂交液,用低严紧性洗膜液Ⅰ洗膜2次。 4. 用高严紧性洗膜液Ⅰ在65℃迅速洗膜5~8次。 5. 最后一次洗膜延时到20 min,洗涤后的滤膜的非特异性信号达到...
DNA探针是最常用的核酸探针,指长度在几百碱基对以上的双链DNA或单链DNA探针。现已获的DNA探针种类很多,有细菌、病毒、原虫、真菌、动物和人类细胞DNA探针,这类探针多为某一基因的全部或部分序列,或某一非编码序列。这些DNA片段须是特异的,如细菌的毒力因子基因探针和人类ALU探针,这些DNA探针的获得有赖于分子克隆...
LT-DNA基因探针技术是一种基于DNA分子杂交技术的检测方法。该技术利用特定的DNA探针与被检测样本中的目标DNA序列进行杂交,从而检测出目标DNA序列的存在。在产毒大肠杆菌检测中,科学家们设计了一种特定LT-DNA基因探针,该探针能够与产毒大肠杆菌的LT-DNA基因序列进行特异性杂交,从而检测出产毒大肠杆菌的存在。LT-DNA...
基因芯片的测序原理是DNA分子杂交测序方法,即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法。先在一块基片表面固定序列已知的八核苷酸的 探针当溶液中带有荧光标记的
基因芯片的测序原理是DNA分子杂交测序方法,即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法。先在一块基片表面固定序列已知的八核苷酸的探针,当溶液中带有荧光标记的靶核酸序列,与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时,通过确定荧光强度最强的探针位置,获得一组序列完全互补的探针序列。据此可重组出靶核...
掌握缺口平移(Nick--Translation)标记DNA探针的原理和方法,掌握同位素探针检测植物病毒的方法。 二.原理 核酸杂交是指两条来源不同的单链核酸依据碱基互补配对原理,在一定的温度和离子强度条件下会形成稳定的异质双链的过程。已知序列的核酸片段(可用放射形同位素或地高辛、生物素等非放射性标记物标记)称为探针,被检测...
基因芯片的测序原理是DNA分子杂交测序方法.即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法先在一块基因芯片表面固定序列已知的八核苷酸的探针.当溶液中带有荧光标记的靶核酸序列.与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时.通过确定荧光强度最强的探针位置.
本发明属于生物,涉及一种dna探针杂交结合s1核酸酶消化分析trna中第58位m1a修饰的分析方法。 背景技术: 1、rna中除了四种正常核苷:腺嘌呤核苷(a)、鸟嘌呤核苷(g)、尿嘧啶核苷(u)、胞嘧啶核苷(c)外,还包含丰富多样的修饰核苷。迄今为止,已在rna中鉴定出150多种具有重要功能的表观遗传学修饰。腺嘌呤n1位置上发生...
应用PCR-DNA探针杂交法检测丙型肝炎核糖核酸
本研究采用基于巢式pcr的hbv p基因序列测定法检测慢性乙型肝炎患者血清hbv基因变异情况,并与线性反向探针杂交法检测结果比较,同时对新发现的若干hbv dna耐药突变位点进行分析。现将实验结果报告如下。 1病例资料 2008年10月2009年10月本院门诊及住院的慢性乙型肝炎患者43例,其中男32例,女11例,年龄19—65岁,平均年龄...