dhfr-mtx系统实现高效表达的关键在于基因扩增和选择机制。首先,将含有目的基因和DHFR基因的质粒共转染到CHO-dhfr-细胞中,通过筛选获得稳定整合的细胞克隆。然后,利用MTX的抑制作用和选择机制,逐步提高MTX浓度,筛选出DHFR基因高拷贝数的细胞克隆。由于目的基因与DHFR基因共...
DHFR-MTX基因扩增原理 相关知识点: 试题来源: 解析 DHFR缺陷型的细胞,不含二氢叶酸还原酶基因,不能合成核酸,必须在含有HT的培养基里生长。 当转染的目的基因连有dhfr基因时,阳性细胞也就获得了dhfr基因。MTX是二氢叶酸还原酶的抑制剂,可阻碍其作用。当细胞培养基内含有MTX时,二氢叶酸还原酶被抑制,通过反馈调节...
Structure of DHFR-MTX-NADPH complex (PDB: 3DAU).Masaru, MiyagiQun, WanMd., Faiz AhmadGiridharan, GokulranganSara, E. TomechkoBrad, BennettChris, Dealwis
甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)化学结构类似 叶酸,与叶酸竞争,抑制二氢叶酸还原酶,使FH 2 → FH 4 →DNA合成受阻;也能干扰嘌呤核苷酸的合成 蛋白质合成障碍。→儿童急性白血病 疾然芜爷匝脞仟他舟霭爬杌峁竞寅忻炕箨洌汹沧窖炳匹钠套碗呒卦栉鳎禁八苤帅浮翊 ...
[结果]本试验成功建立三株人骨肉瘤耐药细胞系U2-OS/R1-R3中,荧光定量PCR结果显示MTX耐药与DHFRmRNA表达增加有关,与RFCmRNA的表达降低有关,与 GST-πmRNA的表达增加有关。[结论]本试验在基因水平探讨人骨肉瘤细胞MTX化疗耐药机制, DHFR、GST-π基因表达的增加及RFC基因表达的降低参与了人骨肉瘤细胞的MTX耐药,为...
抑制DHFR和TS,而是通过上调转录因子E2F4或者抑制转录因子E2F1抑制了这两个蛋白的mRNA水平.而深入的分析则表明,二甲双胍还可以促进DHFR的蛋白降解,而这种降解是由溶酶体降解通路介导的.我们还发现,Hsp40蛋白家族成员DNAJB1,自噬过程的起始分子Beclinl和溶酶体中的半胱氨酸肽酶Cathepsin B也参与了二甲双胍对DHFR降解的...
Dihydrofolate reductase (DHFR) catalyses the reduction of dihydrofolate to tetrahydrofolate required for the synthesis of thymidine and purines. Methotrexate (MTX) acts as a tight-binding inhibitor of DHFR and remains an important chemotherapeutic agent for treatment of leukemias and lymphomas. A single...
百度试题 题目下列哪个筛选系统用到了MTX( )。 A.DHFR筛选系统B.GS筛选系统C.G418筛选系统D.蓝白斑筛选系统相关知识点: 试题来源: 解析 A 反馈 收藏
下班了不过了,二姨夫开始甩货啦#大人也要玩玩具 #手办 #玩具 #潮玩 #摆摊日记 下班了不过了,二姨夫开始甩货啦#大人也要玩玩具 #手办 #玩具 #潮玩 #摆摊日记 44 摆摊人最难的就是刮风减半下雨全没#摆摊 #vlog日常 #玩具 #夜市 #摆摊日记 摆摊人最难的就是刮风减半下雨全没#摆摊 #vlog日常 #玩具 #夜市...
从而得到抗MTX细胞系；又由于与dhfr基因共转染的目的基因倾向于同它一起整合到细胞染色体上的同一区域，所以编码外源重组蛋白的序列片段也随着dhfr基因的扩增而扩增，我们就得到了能大量表达外源蛋白的细胞克隆，这在基因工程抗体及各种基因工程蛋白的表达中是可行度很高的一种措施。