本实验采用的是DEAE-纤维素DE 52 是弱酸型阴离子交换剂,具体处理方法为:先将DE52阴离子交换剂干粉浸泡于蒸馏水中,去除杂质;再在0.5N的HCL溶液中浸泡1-2h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH值中性或PH4以上,并将其在抽滤漏斗中抽干;将抽干的离子交换剂浸泡在0.5N的NaOH溶液中1-2h,再用无离子水或蒸馏水将其洗至...
DEAE纤维素柱原理，基于离子交换层析：离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。阴离子交换基质结合，带有负电荷的蛋白质，然后这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质从而洗脱下来。
我做过DE-52的,也是泡不开的,我没管,直接装上用了,效果还是不错滴 离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相,以蛋白质等样品为移动相,分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。 (一)原理 在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团,当结合阳离子基团时,可换出阴离...
2.Tris-Cl离子交换层析法(Ion-exchange chromatography) 【材料和试剂】(1)DE32或DE52纤维素。(2)HCl;NaOH;0.01～0.05mol/L,pH8.0 PB;0.01mol/L,pH8.6 Tris-Cl;0.5mol/L NaCl。(...阅读全文 可溶性抗原的制备及鉴定2 1、超速离心法 此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同,使具...
(一)原理 离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离,而后流经固定相,使之与固定相上的可解离基团进行离子交换,吸附于固定相上,凡不能进行交换吸附的成分,则流出层析柱外。再根据交换吸附于固定相上的各组分解离度 ...
(1)、DEAE-52 (2)、鸡蛋白蛋白(CEA) (3)、三羧甲基氨基甲烷(Tris) (4)、盐酸 (5)、氯化钠 4-2.试剂配制: (1)、Buffer A(20mM pH8.0 Tris-HCl)的配制: 取Tris g,溶于ml蒸馏水中,用ml HCl调至pH8.0 (2)、Buffer B的配制: Buffer A加1.0M NaCl (3):CEA样液的配制: 20.0mg CEA+1ml Buffe...
野津等:DEAE-52在中药多糖分离纯化中的应用* 2019年第11期 2分离原理 高分子聚合物和电荷集团通过共价结合,形成 一个带电的可进行离子交换的基团。反离子是结合 于电荷基团上的平衡离子,它能与溶液中其它的离 子基团发生可逆的交换反应,分离的过程将溶液中 的待分离成分,依靠库仑力和电荷差异吸附在离子 交换剂...
DEAE纤维素柱原理,基于离子交换层析:离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。阴离子交换基质结合,带有负电荷的蛋白质,然后这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质从而洗脱下来。
以DEAE cellucose-52为列,它是一种阴离子交换柱,填料为二乙氨乙基纤维素,含有NH3或NH2功能基。适用于分离中性和酸性蛋白、多糖、核酸等物质,也适用于植物提取。它的分离纯化原理如图2所示,阴离子色谱柱填料颗粒上带有正电荷,混合的粗多糖样品上样之后,其中的阴离子多糖(酸性多糖,如果胶以及其他的植物性多糖等)由...