1.葡聚糖凝胶Sephadex G-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部 最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质) 2.利用离子交换法,选取DEAE-阴离子纤维素DE52柱材料,因为PPO是带有阳离子的蛋白质,在...
deae纤维素de-52柱的分离效果与待分离物的分子量密切相关。一般而言,较小分子量的化合物在deae纤维素de-52柱上的分离效果更好。这是因为较小的化合物能够更容易地与柱层析介质发生相互作用,并在柱中停留更长的时间,从而实现更好的分离效果。 然而,需要注意的是,deae纤维素de-52柱并不能对所有分子量的化合物进...
DEAE-52因是离子型介质,一般常用酸碱处理,先用0.5mol NaOH碱洗,蒸馏水洗至中性后,再用0.5molHCl...
采用不同离子强度溶液分步洗 脱,得到不同组分的多糖,达到分离效果。 3 使用方法 3.1 装柱前处理 DEAE-52 离子交换剂装柱前之前要充分溶胀,溶胀后,离子交换剂孔隙增大, 利于离子交换。溶胀的同时可以将溶液中的悬浮杂质去除,接下来进行酸碱浸 泡,首先用 0.5mol·L-1 NaOH 溶液浸泡 1h 以上,抽滤,去离子水反复...
DEAE-52因是离子型介质,一般常用酸碱处理,先用0.5mol NaOH碱洗,蒸馏水洗至中性后,再用0.5molHCl酸洗,蒸馏水洗至中性,再用0.5mol NaOH碱洗,蒸馏水洗至中性。然后用你的初始洗脱液平衡后上样正常分离就可以了。需要注意的是酸碱洗脱时时间要短。
DEAE纤维素柱原理,基于离子交换层析:离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。阴离子交换基质结合,带有负电荷的蛋白质,然后这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质从而洗脱下来。
(一)原理 离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离,而后流经固定相,使之与固定相上的可解离基团进行离子交换,吸附于固定相上,凡不能进行交换吸附的成分,则流出层析柱外。再根据交换吸附于固定相上的各组分解离度 ...
参考了DEAE-52的分离原理,是阴离子交换,按道理来讲不同梯度的盐氯离子交换程度应该是不同的,洗脱...
以DEAE cellucose-52为列,它是一种阴离子交换柱,填料为二乙氨乙基纤维素,含有NH3或NH2功能基。适用于分离中性和酸性蛋白、多糖、核酸等物质,也适用于植物提取。它的分离纯化原理如图2所示,阴离子色谱柱填料颗粒上带有正电荷,混合的粗多糖样品上样之后,其中的阴离子多糖(酸性多糖,如果胶以及其他的植物性多糖等)由...
麻烦各位前辈们,各位老师们指导一下,最近在做真菌多糖的分离纯化,准备用DEAE52纤维素进行分离多糖。目...