1、每次用完最好用0.5MNaOH含2M NaCl洗5个床体积,再用水洗5个柱床体积,然后用20%乙醇保存,使用3-5次后在水洗之后再用70%的乙醇或30%异丙醇都含1%吐温洗5个柱床体积,最后20%的乙醇流洗5个柱床体积。 2、有机溶剂和水混合很容易产生气泡,为了避免这样情况,可以把配好的有机溶剂在室温放置过夜,再使用,这...
1、每次用完最好用0.5MNaOH含2M NaCl洗5个床体积,再用水洗5个柱床体积,然后用20%乙醇保存,使用3-5次后在水洗之后再用70%的乙醇或30%异丙醇都含1%吐温洗5个柱床体积,最后20%的乙醇流洗5个柱床体积。 2、有机溶剂和水混合很容易产生气泡,为了避免这样情况,可以把配好的有机溶剂在室温放置过夜,再使用,这...
DEAE-纤维素(52) 使用说明书 一 简介 DEAE-纤维素,它采用平均粒径为50μm的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,它在高流水下保持更高载量,同时又具有更好的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒,质粒等超大分子的...
该法在上述方法的基础上稍加改良,即通过梯度洗脱,可用于血清中IgG和IgM的提取。 DEAE-纤维素DE-52使用说明【材料和试剂】 (1)DE52纤维素。 (2)待纯化标本:杂交瘤腹水或培养上清,免疫血清或饱和硫酸铵粗提品。 (3)1.5×50cm 层析柱;透析袋及其他透析和层析所需的试剂和器材。
本实验采用的是DEAE－纤维素DE 52 是弱酸型阴离子交换剂，具体处理方法为：先将DE52阴离子交换剂干粉浸泡于蒸馏水中，去除杂质；再在0.5N的HCL溶液中浸泡1－2h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH值中性或PH4以上，并将其在抽滤漏斗中抽干；将抽干的离子交换剂浸泡在0.5N的NaOH溶液中1－2h，再用无...
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DEAE—纤维素的活化过程如下：首先，取适量的IgDEAE32或52，比如1克，放入5毫升的量筒中，加入蒸馏水并浸泡过夜。待DEAE完全溶胀后，观察其体积。根据需要的层析柱柱床体积，计算所需的DEAE用量，然后同样用蒸馏水浸泡过夜，期间需更换几次水，以去除细小颗粒。使用布氏漏斗抽干后，用0.5毫升/升的NaOH...
本实验采用的是DEAE-纤维素DE 52是弱酸型阴离子交换剂,具体处理方法为:先将DE52阴离子交换剂干粉浸泡于蒸馏水中,去除杂质;再在0.5N的HCL溶液中浸泡1-2h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH值中性或PH4以上,并将其在抽滤漏斗中抽干;将抽干的离子交换剂浸泡在0.5N的NaOH溶液中1-2h,再用无离子水或蒸馏水将其洗至...
DEAE纤维素柱原理，基于离子交换层析：离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。阴离子交换基质结合，带有负电荷的蛋白质，然后这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质从而洗脱下来。
3使用方法 3.1装柱前处理 DEAE-52离子交换剂装柱前之前要充分溶胀, 溶胀后,离子交换剂孔隙增大,利于离子交换。溶胀 的同时可以将溶液中的悬浮杂质去除,接下来进行 酸碱浸泡,首先用0.5mol・L" NaOH溶液浸泡lh以 上,抽滤,去离子水反复冲洗至中性;再用0.5mol-L-' HC1溶液浸泡lh以上,抽滤,去离子水冲洗至中性,...