DEAE纤维素柱原理,基于离子交换层析:离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。阴离子交换基质结合,带有负电荷的蛋白质,然后这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质从而洗脱下来。
方法/步骤 1 首先,控制柱下端螺旋夹,使柱上缓冲液面刚好下降到纤维素床表面,柱下端用10m刻度离心管收集液体,以便了解加样后液体流出量。2 然后,将除盐后收集的清蛋白溶液缓慢加到纤维素柱上,调节层析柱下端的螺旋夹,使样品进入纤维素柱床,至液面降到纤维素柱床表面为止。3 然后,将除盐的粗制清蛋白...
层析柱收集器磁力搅拌器搅拌子烧杯玻璃砂漏斗水泵抽滤瓶pH试纸pH计三通管紫外比色杯尿糖试纸电导率仪 实验步骤 1. 离子交换剂的处理 称取1.5 克DEAE 纤维素( DE-23 ) 干粉, 加入0 . 5 mol/ LNaOH 溶液( 约50ml) , 轻轻搅拌, 浸泡至少0.5 小时( 不超过1 小时) , 用玻璃砂漏斗抽滤, 并用去离子水洗至...
实验二十四 实验二十四 DEAE-纤维素离子交换层析 (DEAE-cellulose ion exchange chromatography) 实验目的 1.掌握离子交换层析原理与实验操作技术。 2.掌握紫外检测仪、自动部分收集器、记录仪、 恒压高位槽的原理与使用方法。 实验器材和试剂 • 实验器材 pH计、层析柱、铁架台,聚乙烯管(不同规格)、HD-3紫外检测...
离子交换层析法。离子交换剂有阳离子交换剂(如:羧甲基纤维素;CM-纤维素)和阴离子交换剂(二乙氨基乙基纤维素;DEAE等,当被分离的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时,带有与
DEAE-纤维素为二乙氨乙基纤维素,是阴离子交换剂。基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。离子交换层析中...
DEAE-纤维素为二乙氨乙基纤维素,是阴离子交换剂。基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH...
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