因此,准确检测ROS的水平对于理解细胞信号传导和疾病机制至关重要。 DCFH-DA(二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯)本身无荧光,可自由透过活细胞膜进入细胞内,并被细胞内的酯酶水解,形成DCFH,DCFH无荧光且不能通透细胞膜,从而被细胞内的活性氧氧化生成有荧光的DCF。根据活细胞中荧光的产生,可以判断细胞活性氧的含量和变化。 实...
DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平[1, 2]。
3、参数设置使用488nm激发波长,525nm发射波长,实时或逐时间点检测刺激前后荧光的强弱。DCF的荧光光谱和FITC非常相似,可以用FITC的参数设置检测DCF。DCF的激发光谱和发射光谱参考下图。4、其它说明阳性对照可以按照1:1000的比例使用。例如装载好探针的细胞共1毫升,可以加入1微升的阳性对照刺激。通常刺激后20-30分钟内可以...
DCFH-DA是一种非极性分子,可以自由穿透细胞膜进入细胞内。在细胞内,DCFH-DA被酯酶水解成DCFH,DCFH可以被ROS氧化成DCF,DCF发出绿色荧光,荧光强度与ROS的浓度成正比。因此,DCFH-DA可以用于检测细胞内ROS的含量。 二、DCFH-DA的应用 DCFH-DA广泛应用于细胞...
贝博® BBoxiProbe® 活性氧检测试剂盒是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被标记到细胞内。在活性氧存在的条件下,DCFH被氧化生成荧光物质DCF,绿色荧光强度与细胞内...
2DCFDA(DCFH-DA)是一种通用的氧化应激指示剂。具细胞膜渗透性,本身无荧光。一旦进入细胞后,被细胞酯酶水解生成2',7'-二氯二氢荧光素(2',7'-Dichlorodihydrofluorescein,DCFH),之后被快速氧化生成强荧光产物2',7'-二氯荧光素(2',7'-dichlorofluorescein,DCF),可用荧光光谱检测(Ex/Em= 504/529nm)。适用于检测...
在活性氧存在的条件下,DCFH被氧化生成荧光物质DCF,绿色荧光强度与细胞内活性氧水平成正比,检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。在激发波长502nm,发射波长530nm附近,使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测DCF荧光,从而测定细胞内活性氧水平。活性氧(ROS)包括超氧自由...
DCFH-DA(二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯)本身无荧光,可自由透过活细胞膜进入细胞内,并被细胞内的酯酶水解,形成DCFH,DCFH无荧光且不能通透细胞膜,从而被细胞内的活性氧氧化生成有荧光的DCF。根据活细胞中荧光的产生,可以判断细胞活性氧的含量和变化。 实验步骤 ...
DCFH能够被ROS氧化成为强荧光产物DCF,因此可以用来检测ROS的产生情况。 二、DCFH-DA荧光探针原理 1. DCFH-DA的特点 DCFH-DA具有以下特点: (1)易于渗透细胞膜:由于其结构中含有酯基,可以很容易地穿过细胞膜进入到细胞内部。 (2)不具有荧光:DCFH-DA在细胞内并不会自发发出荧光信号,而需要被ROS氧化后才会发出强烈...
2',7'-二氯二氢荧光素(DCFH)是一种传统的检测ROS的探针，它自身无荧光，当它被 ROS氧化成2',7'-二氯荧光素(DCF)时，即发出强烈荧光．这种荧光探针的灵敏度和对不同ROS的选择性较差。DCFH 的双乙酸酯衍生物2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)，该探针较DCFH有好的脂溶性和透膜性，应用于细胞内ROS的...