DCFH-DA检测法被广泛应用于反应氧化应激和自由基生成的过程。 DCFH-DA检测法实际上是一种间接测定活性氧的方法。原理基于DCFH-DA能够通过酯酶水解成DCFH,而DCFH可以直接或通过活性氧来氧化生成DCF。因此,DCF的荧光强度与细胞内的活性氧水平成正相关。DCFH-DA检测法常用于检测细胞或组织中的过氧化氢(H2O2)、羟自由基...
通过测定细胞内ROS水平,可以辅助临床医生对疾病进行早期诊断和病情监测,为个体化治疗提供依据。根据细胞内ROS的分布和水平,还可设计针对氧化应激的靶向治疗策略。 五、 dc fhd-da荧光探针实验方法的发展与前景 dcfh-da荧光探针实验方法作为一种常用的氧化应激实验技术,已经在许多研究领域得到了广泛应用。随着科研技术的...
在活性氧存在的条件下,DCFH被氧化⽣成荧光物质DCF,绿⾊荧光强度与细胞内活性氧⽔平成正⽐,检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的⽔平。在激发波长502 nm,发射波长530 nm附近,使⽤荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测DCF 荧光,从⽽测定细胞内活性氧⽔平...
2、探针装载完毕并洗净残余探针后,可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的装载情况是否良好。 3、尽量缩短探针装载后到测定所用的时间(刺激时间除外),以减少各种可能的误差。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 二、使用说明 1、装载探针 对于刺激时间较短(通常为2小时以内)的...
活性氧的检测技术主要分为直接检测法和间接检测法。直接检测法主要通过对活性氧的特定物理或化学性质进行测定,如电子顺磁共振(EPR)、荧光探针和化学发光等。间接检测法则是通过测定活性氧对其他物质的氧化反应来间接评价活性氧的水平,如酶活性测定法和抗氧化剂测定法等。本文将主要介绍直接检测法中常用的电子顺磁共振法...
5.将细胞暴露于实验刺激物之前,先测定加载细胞的背景荧光强度。 6.根据以下情况评估阴性对照(Negative control), ①绿色发射光谱内检查未染色细胞的自荧光情况。 ②对于流式分析,查明染料加载和处理后细胞的前向角散射和侧向角散射是不变。细胞尺寸的变化可能与起泡或萎缩有关,由于处理或有毒反应引起的。
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探针装载后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。 探针装载完毕并洗净残余探针后,可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的装载情况是否良好。DCF的激发光谱和发射光谱请参考图谱。 尽量缩短探针装载后到测定所用的时间(刺激时间除外),以减少各种可能的误差。
H2DCFDA (DCFH-DA) 是一种可渗透细胞的,用于检测细胞内活性氧 (ROS) 的探针 (Ex/Em=488/525 nm),H2DCFDA (DCFH-DA) 别称有以下的叫法: DCFH-DA 活性氧ROS荧光探针 英文名称:2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate DCFH-DA,羟基自由基探针,cas4091-99-0 活性氧荧光探针(DCFH-DA) H2DCFDA(DCFH-DA) 2'...
5.将细胞暴露于实验刺激物之前,先测定加载细胞的背景荧光强度。 6.根据以下情况评估阴性对照(Negative control), ①绿色发射光谱内检查未染色细胞的自荧光情况。 ②对于流式分析,查明染料加载和处理后细胞的前向角散射和侧向角散射是不变。细胞尺寸的变化可能与起泡或萎缩有关,由于处理或有毒反应引起的。