另外,对于某些细胞,如果发现没有刺激的阴性对照细胞荧光也比较强,可以按照1:2000-1:5000稀释DCFH-DA,使装载探针时DCFH-DA的浓度为2-5微摩尔/升。探针装载的时间也可以根据情况在15-60分钟内适当进行调整。 脂质ROS检测 由铁死亡引起的细胞死亡的一大特征是细胞膜中脂质发生过氧化反应,通常表现为脂质过氧化物的积累...
我现在的操作方法:20ml平行样2个,分别加入dcfh-da-dmso 5μL,涡旋混合器3min打散菌丝 → 24℃摇床...
· 对于刺激时间较长的细胞,先用活性氧阳性对照物(Rosup)或目标药物刺激细胞,再进行探针装载。 工作液配制: ·将DCFH-DA工作液以1:1000或1:500的比例稀释于无血清细胞培养基或缓冲液(例如PBS)中,使其终浓度为10μM。 细胞染色: · 先用PBS洗涤细胞以去除细胞内药物残留。 · 加入稀释后的探针,在37°C的...
我现在的操作方法:20ml平行样2个,分别加入dcfh-da-dmso 5μL,涡旋混合器3min打散菌丝 → 24℃摇床...