用无血清细胞培养液洗涤细胞三次,以充分去除未进入细胞内的DCFH-DA。 通常活性氧阳性对照在刺激细胞20-30分钟后可以显著提高活性氧水平。 收集细胞后装载探针:按照1:1000用无血清培养液稀释DCFH-DA,使终浓度为10微摩尔/升。细胞收集后悬浮于稀释好的DCFH-DA中,细胞浓度为一百万至二千万/毫升,37℃细胞培养箱内孵...
活性氧荧光探针(DCFH-DA)是一种通用的氧化应激指示剂,具有细胞膜渗透性。它本身无荧光,但一旦进入细胞后,会被细胞酯酶水解生成2",7"-二氯二氢荧光素(DCFH),之后被快速氧化生成强荧光产物2",7"-二氯荧光素(DCF)。通过荧光光谱检测DCF的荧光强度,可以间接反映细胞内活性氧(ROS)的水平。 应用 检测活性氧和一氧化...
DCFH-DA是否能够测细菌的ROS含量呢 DCFH-DA(2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate)是一种用于检测细胞内活性氧(ROS,Reactive Oxygen Species)的荧光探针。它可以在被细胞摄取后被脱去乙酰基,形成DCFH,然后被氧化为高度荧光的2',7'-Dichlorofluorescein(DCF)。DCF的荧光强度与细胞内ROS水平成正比。 对于测量细菌...
活性氧(Reactive oxygen species,ROS) 包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。活性氧检测试剂盒是一种利用荧光探针DCFH-DA 进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶...
本文将介绍dcfh-da荧光探针实验方法,包括准备实验材料、实验步骤、数据分析等内容。 一、准备实验材料 1. dcfh-da荧光探针:这是一种常用的荧光探针,用于检测活性氧(ROS)的水平。实验前需要保证荧光探针的纯度和稳定性。 2. 细胞培养基:用于培养细胞,保证细胞的健康状况。 3. 细胞样本:需要提前培养好的细胞样本,...
DCFH-DA,是一种家喻户晓的活性氧检测试剂。它是2',7'-二氯荧光二乙酸酯的衍生物,可以进入细胞内,在那里它被脱乙酰化为非极性的、不带电荷的2',7'-二氯荧光素(DCFH)。DCFH可以通过氧化作用被ROS氧化为高度荧光的2',7'-二氯荧光素(DCF)。因此,DCFH-DA可以用于测量ROS水平的变化,从而评估细胞内氧化应激的程...
DCFH-DA活性氧检测的原理主要包括两个方面:首先,DCFH-DA通过脂溶性能够迅速进入活细胞,然后在细胞中被酯酶水解为DFCH,DFCH可以被氧化成强荧光的DCF。 然后,DCF可以发射可见光区的绿色荧光,并且荧光的强度和ROS的浓度呈正相关关系。因此,通过测量DFC发出的荧光信号的强度,可以间接反映细胞内ROS的水平。 在实际的检测...
DCFH-DA是可渗透细胞,用于检测细胞内活性氧 (ROS) 的探针。产品用作科学研究,我们不为个人用途提供的产品和服务 实验参考方法 DCFH-DA激酶测定 ROS测量 为了检测细胞内ROS水平,使用ROS敏感性探针H2DCFDA。 将贴壁细胞(ESC,difESC,eMSC,HeLa,U118)与PBS中的5μM染色溶液在37℃下在黑暗中孵育30分钟,然后用0.05%...
DCFH-DA激酶测定 ROS测量 为了检测细胞内ROS水平,使用ROS敏感性探针H2DCFDA。 将贴壁细胞(ESC,difESC,eMSC,HeLa,U118)与PBS中的5μM染色溶液在37℃下在黑暗中孵育30分钟,然后用0.05%胰蛋白酶-EDTA溶液收获,悬浮在新鲜培养基中,并且 用流式细胞仪立即分析。 将对照和PHA活化的淋巴细胞重悬浮于PBS中,与5μMH2...
H2DCFH-DA探针是一种荧光探针,可用于检测细胞内的ROS水平。在细胞内,H2DCFH-DA探针被酯酶水解,去除乙酸基团后转变为2',7'-二氯二氢荧光素(DCF),并发出绿色荧光。在氧化环境中,H2DCFH-DA探针的转变过程尤为明显,因此可用于检测ROS的水平。 二、H2DCFH-DA探针的使...