VPR、SAM或SunTag)或转录抑制因子(如KRAB)融合后,结合sgRNA能促进或抑制目的基因的表达。 CRISPR-dCas9系统是通过激活或抑制细胞内源基因表达来提高或抑制目标基因的表达量,它不需要转入外源DNA,操作更简易。此系统可在同一个启动子上设计多个sgRNA来提高或抑制基因的转录活性,目的基因的转录本也会覆盖的更全面。
当 sgRNA 与桥 RNA 介导的复合物一起在 HEK293T 细胞中共表达时,观察到通过 qRT-PCR 测量的靶基因的 mRNA 水平显着增加(图2a)。此外,与传统使用的 dCas9-VPR 系统相比,桥 RNA 介导的转录激活系统使 NeuroD1 表达增加 6.1 倍,使 A...
当sgRNA与桥RNA介导的复合物一起在HEK293T细胞中共表达时,观察到通过qRT-PCR测量的靶基因的mRNA水平显着增加(图2a)。此外,与传统使用的dCas9-VPR系统相比,桥RNA介导的转录激活系统使NEUROD1表达增加6.1倍,使ACTC1表达增加2.9倍(图2b...
按照转录激活系统的发展和作用效果,将其分为基础型转录激活系统和增强型转录激活系统。增强型转录激活系统包括VPR 系统、Sun Tag 系统和SAM系统。三种系统各有特点,且都能显著增强目的基因的转录激活效率。 (2) dCas9- 表观遗传修饰系统; 表观遗传修饰对基因表达的调控发挥着重要的作用。基于CRISPR-Cas9统的易操作...
Accelerate your gene editing experiments with "CRISPR-ready" stable Cas9-expressing cell lines Choose from a range of popular cell backgrounds, available for both Cas9 (CRISPR knockout) and dCas9-VPR (CRISPR activation) so you can complete gain- and loss-of-function studies in the same back...
由于这个系统需要设计修饰的sgRNA,人们开发了第三代dCas9-SAM系统,也称为dCas9-VPR系统。这个系统由VP64,p65和RTA融合而成,且不需要修改的sgRNA。因此,这大大简化了设计过程。当与sgRNA文库结合使用时,该系统还能够支持大规模的全基因组功能激活,使其成为研究生物学过程和途径的有力工具。
英文名称: pAct:dCas9-VPR昆虫编辑质粒 保质期: 3个月/12个月以上 保存条件: -20℃/-80℃ pAct:dCas9-VPR昆虫编辑质粒信息 规格:2ug 保质期:3个月 保存温度:-20℃ 使用说明 1、收到质粒干粉后请5000rpm离心1min ,再加入20ul ddH2O溶解质粒 2、取2ul质粒转化至100ul感受态中,冰浴30min后,42℃...
将CAG-LoxP-STOP-LoxP-dCas9-VPR-IRES-EGFP-WPRE-polyA结构插入到Rosa26基因中。失活的dCas9与三元转录激活因子VPR(VP64-p65-Rta)融合,与Cre工具鼠交配后,可在有Cre表达的细胞中对目的基因进行转录激活调控,增强目的基因的表达。 应用领域:基因调控工具,基因激活,CRISPRa ...
Lentiviral dCas9-VPR vectors for robust gene activation in a broad range of relevant cell typesPurified lentiviral particles or plasmid DNA for generation of stable dCas9-VPR nuclease-expressing cell populations Inquire for pricing on larger volumes...
b, Anti-Cas9 ChIP-qPCR at the hs4 and uIghε in cells infected with the indicated dCas9-VPR/sgRNA viruses, as described in Fig. 4a. c, RT-qPCR at hs4 and uIghε from the experiment in (B). For the uIghε, two sets of primers were used probing the region upstream and ...