作者使用化学微干扰的技术手段,证明了dCas9–SSAP编辑的假设机制:RNA引导的dCas9与基因组靶标结合,并使其可被SSAP访问,SSAP在不需要DNA断裂的情况下促进同源定向插入(图1)。对这一过程的更深入理解将需要进一步的研究,例如,dCas9–SSAP编辑器的生物物理分析、调节基因组可及性和修复途径的进一步分析。 七、最大限...
总体而言，dCas9-SSAP 基因编辑工具能够在不引入DNA双链断裂的前提下进行高效、安全、精准的长片段外源DNA的插入，从而第一次揭示了无切割基因编辑工具的可行性和应用潜力。图1：dCas9-SSAP 工作原理 图2：与经典CRISPR基因编辑需要对DNA进行切割会产生随机突变，而dCas9-SSAP则不需要切割DNA可实现精确编辑 原文链接...
总体而言,dCas9-SSAP 基因编辑工具能够在不引入DNA双链断裂的前提下进行高效、安全、精准的长片段外源DNA的插入,从而第一次揭示了无切割基因编辑工具的可行性和应用潜力。 图1:dCas9-SSAP 工作原理 图2:与经典CRISPR基因编辑需要对DNA进...
dCas9–SSAP的效率通常与Cas9相当或高于Cas9。因此,作者得出结论,dCas9–SSAP与基于Cas9的编辑器具有相似的效率水平。 图18 Knock-in gene editing in hESC (H9) cells using the dCas9–SSAP editor. The knock-in efficiencies of the Cas9, Cas9 HDR and dCas9–SSAP editors (e; n= 2 biologically i...
总体而言,dCas9-SSAP 基因编辑工具能够在不引入DNA双链断裂的前提下进行高效、安全、精准的长片段外源DNA的插入,从而第一次揭示了无切割基因编辑工具的可行性和应用潜力。 图1:dCas9-SSAP 工作原理 图2:与经典CRISPR基因编辑需要对DNA进行切割会产生随机突变,而dCas9-SSAP则不需要切割DNA可实现精确编辑 ...