一、DAPI染色原理 DAPI染色 DAPI是一种DNA亲和性染料,特异性地结合DNA双链螺旋的小沟和孔隙,形成明亮的蓝紫色荧光。这种结合能力基于DAPI分子的化学结构,其双氨基基团能与DNA中的腺嘌呤碱基发生氢键和茂环间的π-π堆积相互作用。由于DNA是细胞核的主要组成部分,因此DAPI染色可以有效地标记细胞核。 DAPI染色 二、
DAPI染色步骤 1. 用1mL 的 ddH2O 将 DAPI进行溶解，制成为： 2.9mM 的 DAPI溶液（1mg DAPI：1mL H2O）。 备注：DAPI 不能直接采用 PBS 等缓冲溶液进行溶解，需要先用水将其溶解。 2. 取适量 DAPI水溶液 加到 PBS缓冲液中，制成：10~50µM 的 DAPI溶液， 推荐采用：PBS配制方法： 使用 8.00g,NaC...
2.加入足足量的 300 nm DAPI 染色液以覆盖细胞。 3.避光孵育 1-5 分钟。 4.去除染料溶液。 5.用 PBS 洗涤细胞 2-3 次。 6.对细胞进行成像 光谱信息及存储条件 DAPI 激发/发射 (nm)358/461 标准滤光片组DAPI EVOS 光色块DAPI 储存条件≤–20°C ...
3. DAPI染色实验操作步骤：（1）将培养的单层细胞（未固定）或新鲜组织等冷冻切片，用PBS冲洗5分钟； （2）DAPI工作溶液在室温下染色5-20分钟（根据实验材料而定）（取决于染色结果）； （3）PBS冲洗； （4）水溶性贴片，游离细胞也可以直接用含DAPI的PBS贴片； （5）荧光显微镜观察。四、DAPI染色实验所需试剂...
DAPI染色步骤 1. 将1mg的DAPI用1mL的ddH2O溶解，制成2.9mM的DAPI溶液（1mg DAPI：1mL H2O）。请注意，DAPI不能直接用PBS等缓冲溶液溶解，需要先用水溶解。2. 将适量DAPI水溶液加入PBS缓冲液中，制成10~50µM的DAPI溶液，推荐使用以下PBS配制方法：将8.00g的NaCl、0.20g的KCl、2.9g的...
在细胞移植前，将DAPI以一定浓度加入培养基中，与细胞共同孵育过夜。使用后，用PBS缓冲液漂洗细胞至少六次，以去除未结合的DAPI。随后，进行酶消化并离心收集细胞，制备细胞悬液以备用。DAPI染色步骤至此完成。存储DAPI时，需将其置于-20℃环境中避光保存。此物质的存储条件要求严格，以确保其稳定性和安全...
DAPI实验步骤 1)在染色前的细胞密度约是0.8X105/孔(293T细胞/六孔板每孔)。 2)移去完全培养基,用PBS清洗一次。 3)用10%的甲醛溶液或者4%的多聚甲醛PBS在室温固定20分钟。 4)用PBS在室温漂洗三次,每次10分钟。 5)用含0.5%Triton-X-100的PBS在室温通透化处理15分钟。
免疫染色(immunol staining)包括免疫荧光(immunol fluorescence)、免疫组化(immunol histochemistry)、免疫细胞化学(immunol cytochemistry)等,可以参考如下步骤进行操作。 1. 样品准备(Sample preparation) 对于贴壁细胞: 可以直接用多孔板,例如6孔板、24孔板等,培养细胞,然后到预定时间时进行固定等后续操作。 也可以用洁净...
当然 DAPI 也用于普通 细胞核染色 及特定情况下双链DNA的染色使用。3. DAPI 结构式:4. DAPI溶液 使用步骤：a. 取1mg的DAPI粉末，离心使粉末沉积在保存管底，后取1mL 的ddH2O将 DAPI粉末溶解，可以制备出 2.9mM的DAPI溶液（1mgDAPI/1mL H2O）。 备注：※ 不使用的制备液需要按照每次试验需求量分装存储，...
染色步骤：将DAPI溶液直接滴在载玻片上，用于染色染色体。操作时需谨慎，确保不会直接接触皮肤。避光操作：染色过程中应尽量在避光环境下进行，可以使用盖子或其他遮光工具来保护溶液不受光照影响。四、注意事项 毒性防护：DAPI具有一定毒性，操作时需佩戴适当的防护装备，避免直接接触皮肤。清洗载玻片：染色后...