CY3-NHS酯(Cyanine 3 NHS ester)是一种特殊的生物偶联物,主要用于生物正交化学中,用CY3荧光团标记生物分子、细胞或其他靶标。它可以标记的物质主要包括以下几类:蛋白质:CY3-NHS酯可以与蛋白质上的伯胺基团反应,形成稳定的共价键,从而实现蛋白质的荧光标记。这种标记方法广泛用于蛋白质的定位、定性和定量研究。
Cy3-NHS酯标记蛋白或抗体后,如何高效纯化?(1)凝胶过滤层析法:将标记反应液通过大小孔径合适的凝胶过滤柱,用适当的缓冲液洗脱,收集流出液中的Cy3-蛋白标记物,并测定蛋白浓度和荧光强度。这种方法简单快速,但可能会造成一些蛋白损失或稀释。(2)逆相高效液相色谱法(RP-HPLC):将标记反应液通过逆相C18柱,...
Cy3 DIGE NHS Ester 是一种基于Cy3荧光染料的衍生物,主要用于蛋白质标记和差异凝胶电泳(DIGE)技术。它的化学结构结合了Cy3荧光染料的特点与NHS酯基团,使其能够与生物分子(特别是蛋白质)中的氨基发生反应,形成稳定的共价结合。Cy3染料本身是由一对共轭芳香环组成,结构中具有一个强烈的电子共轭系统,使其具有在...
通常在有机溶剂如DMSO中制备。 2.抗体或蛋白质:确保您的抗体或蛋白质处于适当的缓冲液中,以维持其稳定性。 3.缓冲液:选择适当的碳酸氢盐缓冲液,通常pH为8.5-9.0。 步骤: 1.准备Cy3-NHS ester溶液: - 从冷冻存储中取出Cy3-NHS ester并尽快溶解在有机溶剂(例如DMSO)中,制备适当浓度的溶液。 - 注意:Cy3-NHS...
荧光标记方法:1. 预处理蛋白质:首先,蛋白质需要进行适当的预处理,如除去杂质、调整缓冲液、保持适当的pH值等,以确保标记反应的有效性和准确性。2. 制备荧光标记试剂:将Sulfo-CY3 NHS ester按照生产厂家的推荐方法溶解在适当的溶剂中,形成一定浓度的标记试剂溶液。3. 反应:将预处理后的蛋白质与荧光标记试剂...
Cy3-链霉亲和素和Cy3-NHS酯在蛋白的标记方面有何区别? Cy3链霉亲和素是一种将Cy3荧光染料与链霉亲和素(streptavidin)结合的偶联物,可以用于检测生物素化的生物分子,例如抗体、配体或DNA探针。 它可以用于间接标记法,即先用生物素化的一级抗体或其他生物素化的探针与目标蛋白结合,然后用Cy3链霉亲和素与...
Cy3-NHS活化酯在蛋白质标记方面表现尤为出色。通过与蛋白质上的伯胺基团反应,Cy3-NHS能够形成稳定的酰胺键,实现对蛋白质的荧光标记。这种标记方法不仅适用于细胞成像,还可以用于蛋白质结构和功能的研究,以及蛋白质相互作用的分析。 核酸标记与检测 Cy3-NHS同样适用于DNA和RNA的标记。通过荧光显微镜或流式细胞仪,可以清...
CY3.5-NHS可以用于标记蛋白。标记对象:CY3.5-NHS常被用于标记生物大分子,如蛋白质、核酸等。标记原理:蛋白表面赖氨酸侧链的官能团是伯氨基,伯胺基可以和NHS活化酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯)反应生成稳定链接,从而把Cy3.5分子连接到目标蛋白分子上。荧光特性:CY3.5-NHS具有较长的激发波长和发射波长,通常激发波长...
Cy3 /Cy3.5/Cy5/Cy7.5 NHS 标记多肽和蛋白 Cy3 NHS酯:Cy3 NHS酯是标记生物分子氨基的活性染料,此试剂可标记溶解蛋白,多肽和寡核苷酸/DNA。对于比较敏感的蛋白请选择无需任何共溶剂的,可溶于水的磺酸基-Cy3 NHS酯。分子结构: 一般性质: 外观:红色粉末分子量:590.15 质谱分析M+增量:474.2分子式:C34H40ClN3O4...
特性:这些染料因其荧光特性和NHS酯的反应活性,在生物科学领域有广泛应用。它们可以用于多肽和蛋白质的标记,通过荧光显微镜或流式细胞术等技术,可以观察和分析这些生物分子在细胞内的分布、动态变化以及与其他分子的相互作用。 荧光特性 Cy3.5:激发波长约为550nm,发射波长约为590nm。它类似于Cy3,但具有略微不同的光谱...