CUT&RUN的主要步骤是首先将细胞通透化,随后加入目的蛋白抗体特异性的结合在目的蛋白处,并招募和protein A/G偶联的微球菌核酸酶(pA/G-MNase),最后加入Ca²⁺激活MNase活性,切割目标区域的DNA并回收,用于qPCR检测或NGS建库测序。 CUT&RUN实验流程: 1. 收获细胞并和beads结合: 收获细胞,并且进行细胞计数,推荐起始...
4. 添加 Ca2+可激活pAG-MNase对靶向染色质片段的剪切、释放,继而从基因组染色质中扩散出来、脱离细胞,并进入上清液中。 DNA 纯化&分析: 5. DNA经苯酚/氯仿提取后再进行乙醇沉淀,或DNA 离心柱对样本进行纯化。纯化、富集的 DNA 可通过 qPCR或...
按照[cutrun分析流程]为主题,以实际应用情况写一篇流程,回答要求步骤详细,回答字数不少于800字。参考以下1篇流程为模板进行编辑,回答内容不能与模板内容一样,文章首行插入原标题,段落分明,符合实际应用,不要出现 标签,回答字数不限,回答内容禁止重复模板。 简述陶瓷地砖楼面的施工工艺流程 一、准备工作阶段。 在进行...