利用Cryo-EM技术,还有助于解析SARS-CoV-2刺突蛋白的结构,该结构是病毒攻击细胞的工具,换言之有助于病毒进入人体细胞,目前已有文献报道分辨率为 3.5 Å的结构。了解病毒与人体细胞上特定受体的结合过程将有助于制造有针对性的疫苗、药物和诊断方法。制药企业已经对这项技术表现出越来越浓厚的兴趣,利用它来分析配体...
这为使用cryo-EM技术进行高分辨率蛋白质结构分析提供了强有力的方法学支持。 该技术的成功应用,不仅提高了cryo-EM技术的实用性和效率,还为未来在更多生物大分子结构研究中的广泛应用打下了基础。特别是在药物设计和疾病机理研究等领域,将大有裨益。 Strategies 该研究围绕优化低温电子显微镜(cryo-electron microscopy, ...
优质冷冻标本制备：通过该方法得到的冷冻标本，不仅对比度高，而且冰层厚度适中，为cryo-EM结构分析提供了上乘样品。拓展技术整合空间：ESI-cryoPrep将电喷雾离子化技术与cryo-EM标本制备相融合，为MS和cryo-EM技术的整合提供了新视角和可能，进而为生物结构研究开辟了更多路径。图 ESI-cryoPrep设计与设备示意图图 ESI-...
采用ESI-cryoPrep方法制作的冷冻标本，具有高对比度和适中的冰厚，为cryo-EM结构分析提供了上乘的样品。拓宽技术整合视野 该方法将电喷雾技术与cryo-EM标本制备相融合，为MS和cryo-EM技术的结合探索了新路径，为生物结构研究增添了更多选择。图 ESI-cryoPrep系统设计与设备布局示意图图 ESI-cryoPrep系统的工作流程与...
单颗粒冷冻电镜（cryo-EM）可以解析获得蛋白分子的高分辨率结构，然而蛋白识别互作等过程可能存在诸多中间态...
冷冻电镜(cryo-EM)单颗粒分析技术已经成为结构生物学众多结构解析方法中异军突起的一支,在膜蛋白的结构解析中更是发挥着与日俱增的作用。目前的冷冻电镜单颗粒技术已经能较容易地将分子量大于300千道尔顿且生化性质稳定的蛋白质解析至近原子分辨率(约3 埃水平)。但由于小分子量蛋白质(一般为小于200千道尔顿)颗粒在冷...
2019年12月19日,来自华盛顿大学William A. Catterall和郑宁课题组合作在Cell杂志上在线发表了题为Structure of the Cardiac Sodium Channel的研究论文,作者利用冷冻电镜cryo-EM技术,解析了鼠源NaV1.5以及NaV1.5结合抗心律不齐药物flecainide复合物的高分辨率结构。通过结合功能性研究,该论文不仅揭示了NaV1.5的特异结构与功...
作为一项突破性的结构生物学技术,cryo-EM的流行是许多技术进步的结果,通常被称为“分辨率革命”(参考文献7)。关键驱动力之一是引入了具有直接电子检测功能和更高帧频的新一代相机8。新的相机能够在单电子计数模式下运行并获取电影以补偿成像过程中的移动9。低温电子显微镜通过自动装带器,恒定倍数透镜,漂移减小的机械平...
在最新研究中,研究人员利用低温电子显微镜(Cryo-EM),分析了与ibogaine(一种存在与灌木中,可以改变大脑功能的生物碱)结合的蛋白,并且通过这种方面,他们揭示了5-羟色胺转运蛋白的结构——包括向外开放(outward-open),封闭和向内开放(inward-open,生物通注)的形状。
冷冻电镜技术的核心在于冷冻固定术与高分辨率成像。冷冻固定术通过将样品置于极低温度下，使水分子冻结，形成无定形冰，从而防止样品在电镜下变形。这一过程要求极快的冷却速度，确保水分子在冻结前处于原位，形成透明的玻璃态冰。这种无定形冰作为载体，使生物大分子在低温下保持稳定，为高分辨率成像提供了...