美国食品药品监督管理局(FDA)近日授予分子诊断公司IntelliGenome的CRISPR-TB血液检测“突破性医疗器械”认定。该检测是全球首个结合CRISPR技术与实时定量PCR(聚合酶链反应)的定性检测方法,可直接通过人血清或EDTA血浆样本中的无细胞DNA(cfDNA)检测结核分枝杆菌(MTB),为结核病诊断带来突破性进展。 技术突破:CRISPR+PCR直击...
三、恒温扩增体系选择恒温扩增技术（Isothermal Amplification）是实现快速、精确检测的关键方法之一。它相比传统的PCR方法更加简便和快速，特别是在需要现场快速检测或设备条件有限的情况下显示出了其独特的优势。下面为大家介绍一下常见的恒温扩增体系。1. LAMP（环介导等温扩增）特点: LAMP技术依赖于一组特制的引物和Bst...
传染病病原的快速和特异性检测的金标准是基于核酸的检测方法，如聚合酶链反应(PCR)，但成本高、仪器昂贵且需要训练有素的人员。基于CRISPR-CAS系统的检测方法最近作为基于PCR诊断的替代方法出现。CRISPR检测依赖于crRNA识别特定DNA (DETECTR)或RNA (SHERLOCK)靶标的最佳“设计规则”。最近，Metsky等报道了一种基于神经...
三、恒温扩增体系选择 恒温扩增技术(Isothermal Amplification)是实现快速、精确检测的关键方法之一。它相比传统的PCR方法更加简便和快速,特别是在需要现场快速检测或设备条件有限的情况下显示出了其独特的优势。下面为大家介绍一下常见的恒温扩增体系。 1.LAMP(环介导等温扩增) 特点: LAMP技术依赖于一组特制的引物和Bst...
冠状病毒是一种RNA病毒，这意味着要使用PCR方法，病毒RNA必须首先转化为DNA。此外，这项技术依赖于两步化学反应，包括一个扩增步骤，以提供足够的DNA使其可检测。因此，当前的测试通常需要经过培训的用户、专用试剂和笨重的实验室设备，这严重限制了检测的过程，并导致检测结果的延迟。迄今为止，所有的CRISPR诊断都要求...
研究团队正在尼日利亚测试这种新型的CRISPR分子诊断技术对拉沙病毒检测的准确性如何(图5),并将检测结果跟实验室传统的方法PCR这类诊断金标准进行对比。最终发现SHERLOCK检测技术的费用是传统PCR检测方法的一半,并且节约了一半的时间(从4个小时缩短到2个小时)。虽然两种诊断方法处理样品时均需要电力,但断电对SHERLOCK技术的...
一些实验室利用PCR检测粪便样本中的幽门螺杆菌核酸,但要获得保存完好的粪便样本和完整的核酸比较困难。此外,样品中的某些物质可能会抑制PCR检测。更重要的是,这些非侵入性方法都不能广泛应用于流行病学研究,尤其是大规模筛查感染患者。 因此,护理点检测迫切需要一种快速、准确、简单和便携的新技术。基于金纳米颗粒(AU...
图2. T7E1酶检测切割情况流程示意图 具体实验细节: 1、 引物设计:上下游引物距离切割位点长度不要一样长,保证T7E1错配酶切割过的DNA序列呈现出有长有短,这样琼脂糖电泳后呈现的就是上下不同的条带,且保证靶点距上下游引物均在100bp以上。 2、 制备待检测DNA片段:一般利用设计的特异性引物进行PCR扩增,获得待测...
一、CRISPR双重检测技术检测猴痘病毒 最近全球爆发的猴痘病毒（MPXV），加剧了对MPXV检测方法的迫切需要。尽管定量PCR（qPCR）技术目前是猴痘病毒MPXV诊断的金标准，但与该技术相关的高成本和对复杂仪器的需求限制了广泛应用。近年来，CRISPR技术发展迅速，为即时检测病原体提供了有效的工具。本文利用Cas12a酶和Cas13a酶...
如同任何分子诊断技术,CRISPR测试需要足够的目标DNA进行检测,这通常通过PCR的扩增步骤实现。然而,与传统的PCR诊断不同,CRISPR诊断还可以利用其他扩增方法,这使其在临床和现场应用中更具灵活性。 特别是在即时诊断(POCT)场景下,等温扩增技术(如LAMP)显示出巨大前景。LAMP允许在恒定温度下进行核苷酸序列的扩增,避免了PCR所...