本研究通过电穿孔递送CRISPR-Cas9 RNPs,在原代人B细胞中实现了高效基因敲除和敲入,为研究B细胞生物学和开发基因工程疗法提供了强大工具。这一创新方法不仅克服了病毒转导的局限性,还展示了多基因编辑的广泛潜力。未来,随着基因编辑技术的不断发展,CRISPR-Cas9 RNP电穿孔技术将为免疫细胞研究和治疗开发带来更多可能,为改善患者预后提供新的希望。 参考文献 ...
外泌体递送CRISPR-Cas9 RNP用于肝脏靶向的疾病治疗 浙江大学刘祥瑞、平渊和周天华课题组合作在Science Advances杂志上发表文章,报道了外泌体递送CRISPR-Cas9 RNP用于肝脏靶向的疾病治疗研究成果。该研究开发了一种方法,可以将Cas9 RNP装载到肝星状细胞(HSCs; LX-2)的外泌体中,用于治疗不同的肝脏疾病。与使用原代细胞...
什么是CRISPR-Cas9的RNP体系? 锐博生物riboEDIT™ CRISPR-Cas9 RNP(核糖核蛋白复合物)由化学合成的crRNA、tracrRNA及Cas9蛋白组成,化学合成crRNA和tracrRNA与Cas9蛋白混合后转染细胞,可快速实现靶基因的编辑。与传统Cas9/gRNA质粒转染相比,基因编辑效率更高,脱靶效应更低,且无DNA整合的风险,是更加理想的基因编辑系统。
在CRISPR-Cas9系统中,利用Cas9和化学合成sgRNA形成的核糖核蛋白(RNP)替代传统的质粒、慢病毒转染模式,具有简单快捷、脱靶效应低、编辑效率高、转染效率高,无细胞毒性,无DNA干扰等优势,逐渐成为基因编辑基础科研实验的绝佳选择。如图3所示: △图3.RNP转染 【1】 Song G, Jia M, Chen K, et al. ScienceDirect CR...
由于Cas9是一种含有色氨酸和酪氨酸残基的变构酶, 因此利用nanoDSF技术可以简单、直观地检测导致Cas9重排的RNP复合物的形成。 为了确定hiPSC中使用的dgRNA靶向GFP位点(dgRNA GFP)形成RNP复合物的有效性,作者使用恒定浓度的Cas9 (0.75 mM)与一定浓度范围内的dgRNA, 通过nanoDSF检测,作出升温诱导的蛋白变性曲线检测 (...
CRISPR-Cas9-RNP基因编辑 (KO)试剂盒(20T) 使用说明书 上海电话:021-51320195 E-mail:support@genepharma.com 苏州电话:0512-86668828 E-mail:szsupport@genepharma.com 官网网址:www.genepharma.com 1 B068-V001-20240724 一,产品简介 CRISPR-Cas9 基因编辑技术,通过向导RNA (gRNA )将Cas9 酶靶向目标 DNA 序列 ...
Cas9 RNP复合物的转染优化 两部分的gRNA(crRNA和tracrRNA)加入Opti-MEM无血清培养基中,室温孵育10 min后加入Cas9蛋白(25 nM/孔),再孵育10 min,加入TransIT-X2®转染试剂(1μL/孔)再孵育15 min,形成的转染复合物加入加入24孔板中的HEK293T/17和U2OS细胞...
CRISPR-Cas9已经成为一项依靠Cas9/sgRNA核糖核蛋白复合物(RNP)来靶向和编辑DNA的强大技术。然而,仍然缺乏能够系统性递送RNP的载体。本文报道了一种通用的方法,该方法允许设计修饰的脂质纳米颗粒,以有效地将RNPs运送到细胞中,并编辑包括肌肉、脑、肝脏和肺在内的组织。静脉注射促进了小鼠肺中六个基因的组织特异性、多...
在作物育种中,培育无转基因的基因编辑植物是一大挑战。研究人员利用 CRISPR/Cas9-RNP 复合物转染胡萝卜原生质体开展研究。结果成功获得无转基因编辑的胡萝卜植株,这为培育无转基因编辑作物提供了有效方法。 在农业领域,胡萝卜(Daucus carota L. subsp. sativus Hoffm.,2n=2x=18)作为重要的世界蔬菜作物,是人们膳食中...