CRISPR-Cas9是一种基因编辑技术,可以通过切割DNA序列来实现基因敲除。 CRISPR-Cas9是最新一代基因编辑技术,其工作原理为首先根据靶基因合成sgRNA序列,sgRNA可以和Cas9蛋白结合,因为靶基因和sgRNA序列互补结合,sgRNA可携带着Cas9蛋白精确找到靶基因,并对其进行剪切,产生DNA双链断裂。断裂通过非同源端部连接(NHEJ)或同源定向...
1.基因敲除(Knockout):通过CRISPR-Cas9在目标基因上引入双链断裂(DSB),细胞通过非同源末端连接(NHEJ)修复机制修复断裂,过程中可能引入插入或缺失(indels)突变,导致目标基因功能丧失。 2.基因插入或替换(Knockin):利用同源重组(HDR)机制,在目标基因上引入特定的突变或外源序列。这需要提供一个含有所需改变的同源模板DN...
CRISPR-Cas9技术通过合成sgRNA与Cas9蛋白结合,精确找到靶基因并进行剪切,产生DNA双链断裂,通过NHEJ或HDR机制实现基因敲除。 CRISPR-Cas9技术原理 CRISPR-Cas9技术的基本定义 CRISPR-Cas9是一种革命性的基因编辑技术,它允许科学家在DNA序列的特定位置进行精确的切割、插入或删除操作。这...
2 CRISPR/Cas9技术的原理 CRISPR/Cas9是一种革命性的基因编辑技术,它允许科学家以前所未有的精确度修改DNA序列。CRISPR是“Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats”的缩写,而Cas9是一种与CRISPR相关的核酸酶。我们首先介绍一些CRISPR/Cas9技...
【一、CRISPR-Cas9的基本原理】CRISPR-Cas9 的由来与进步 CRISPR 系统被发现 1993 年，西班牙科学家 Francisco Mojica 最先发现了 CRISPR 序列，还把它说成是原核生物基因组里的短回文重复序列。接着，科学家慢慢明白 CRISPR 序列跟细菌的免疫系统是有关系的。细菌凭借 CRISPR 系统可以存储来自病毒或者外源 DNA 的...
CRISPR/Cas9技术是一种基于细菌和古细菌免疫系统的基因编辑工具，用于精确地修改DNA序列。它在基因组研究、疾病治疗、农业和生物技术领域具有广泛的应用。CRISPR/Cas9的原理 CRISPR（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats，规律成簇间隔短回文重复序列）和Cas9（CRISPR-associated protein 9，CRISPR相关蛋白9...
Cas9是CRISPR系统中的蛋白质,具有核酸酶活性。在基因编辑过程中,Cas9充当“剪刀”,能够精准地切割DNA的特定位置。 🗺️ 导向RNA(gRNA) gRNA是由科学家设计的人工合成RNA,与目标基因序列相匹配。这个gRNA充当导航器,将Cas9引导到特定的基因位置。CRISPR/Cas9的基因编辑过程如下: ...