即loxP位点，使两个loxP位点间发生基因重组。Cre重组酶无需借助任何辅助因子，可作用于多种结构的DNA底物...
例如张峰团队通过CRISPR/Cas9技术成功地构建了小鼠肝癌和肺癌模型,他们首先利用Cre-loxP系统将Cas9基因敲入小鼠体内,构建Cas9小鼠模型后,将筛选出来的3个基因:KRAS、p53和LKB1基因的sgRNA分别转导入小鼠体内,模型鼠发展出了肉眼可见的肺腺癌病理表征,从而证明了KRAS、p53和LKB1基因在肺腺癌发生发展过程中的作用[1]。赛业...
1.Cre-loxP技术简介 Cyclizationrecombinase Cre蛋白于1981年从P1噬菌体中被发现，属于λInt酶超基因家族。Cre重组酶基因编码区序列全长1029bp,编码343个氨基酸,38kDa,单体蛋白。Cre重组酶不仅具有催化活性，而且与限制酶相似，能特异地在两个loxP位点间发生基因重组。Cre重组酶无需借助任何辅助因子，可作用于多种结构...
在这里我解释一下原因:除非是存在特殊的重组位点 (比如loxP) 和作用于这个位点的重组酶 (比如Cre),否则基因组与质粒之间不会发生重组;基因组与编辑模板两者之中至少要有一方是线性的,同源重组才能发生。所以基因组编辑的过程是:Cas9将所有细胞的基因组切断,这时所有细胞都面临死亡的危险,于是每个细胞都用尽全力对自身...
1.1Cre-loxP技术基本原 1.2Cre-loxP技术应用 1.2Cre-loxP技术应用—与组织特异性启动子结合应用，启动子 albumininsulinadiposeprotein2 1.2Cre-loxP技术应用—与诱导性表达启动子结合应用，对 启动子 Mx1CMV-tTA 诱导物 IFNtetracycl 1.3Cre-loxP技术仍有不 2.CRISPR-Cas9技术 传统的基因打靶技术主要依赖于...
Cre-loxP、CRISPR-Cas9技术 与病毒载体在基因敲除中的联用 2016-04-25 Content 第一节、Cre-loxP技术 第二节、CRISPR-Cas9技术 第三节、病毒工具简介 第四节、组合应用示例 基因操作技术一览 Cre蛋白于1981年从P1噬菌体中被发现,属于λInt酶超基因家族。 Cre重组酶基因编码区序列全长1029bp,编码343个氨基酸,38...
利用双CRISPR/Cas9系统可精准地将loxP序列、GUS基因及GFP基因连接,接上35S启动子之后可在组织中检测出蓝色区而无绿色荧光区,这是由于 而无法表达。Cre基因是重组酶基因,经38℃热处理后可被激活表达,在此前提下组织中可检测出绿色荧光区。 相关知识点: 试题来源: 解析 ①. 海蜇的DNA分子上含有绿色荧光蛋白基因...
Cre-loxP与CRISPR-Cs9技术概述 Cre-loxP技术的原理及应用 原理：通过重组酶Cre介导的位点特异性重组将loxP位点间的DN片段进行交换或删除 应用：在基因敲除中用于条件性敲除基因如诱导细胞或组织中的基因表达或沉默 与CRISPR-Cs9技术联用：提高基因敲除的效率和特异性 与病毒载体联用：将Cre-loxP与CRISPR-Cs9技术结合...
他们通过破坏p53和PTEN这两个重要的抑癌基因,使得成年小鼠肝脏生成了肿瘤,建立了肝肿瘤小鼠模型。该小鼠模型出现了与传统的Cre-loxp基因打靶方法构建的PTEN、p53基因敲除小鼠相似的肿瘤表型,但是构建模型的成本更低、速度却更快。 张锋研究团队展示了性能优化的SHERLOCK系统,用于检测人源样本中的寨卡病毒、登革热病毒以及...
作为研究基因体内实验的利器,基因敲除小鼠对于科研人员来说自然不是一个陌生的领域,这其中就涉及到了基因编辑技术领域中最为经典的技术Cre-loxP系统。 因而,课程中则先是详细介绍了Cre-loxP系统的原理,如Cre重组酶和loxp序列的概念与特点、以及Cre重组酶介导loxp序列重组的三种情况。