舒桐生物深耕基因编辑领域多年,自主研发并鉴定了一种新型LtCas12a并已经成功应用于人乳头状瘤病毒HPV的快速诊断中[4]。 舒桐服务 此外, 舒桐科技可提供以下服务,欢迎各位老师垂询: 1、舒桐生物可提供多种高纯度、高活性的Cas12a蛋白: 2、Cas12a的crRNA设计服务,利用生信预测并筛选脱靶效率低的靶点 3、HPLC
1类CRISPR-Cas系统在细菌和古细菌当中最为常见,所占比例在所有已鉴定CRISPR-Cas基因座中高达90%。2类CRISPR-Cas系统包括剩余的10%几乎只存在于细菌中,并组装成一个核糖-核蛋白复合物,由crRNA与Cas蛋白组成,crRNA包含靶向特定DNA序列的信息。 目前所流行的Cas9与...
cas12a在激活后也会逐渐失去活性,这在一定程度上限制了其非特异性DNA内切的范围。但在DNA浓度高的条件下,仍可能产生较大范围的非特异性切割。 7. 应用: cas12a可用于DNA的高灵敏度检测、基因编辑、转基因等应用。crRNA设计决定了其靶向性,继而影响其应用效果。但非特异性切割也需要在应用设计中加以控制。Cas1...
Cas12a 的引导 RNA(crRNA)同样别具一格。它结构精简,仅需约 42 nt 的 crRNA 便能独当一面,完全摆脱了 Cas9 所需的 tracrRNA 的依赖,大大简化了 RNA 设计流程,为实验操作带来极大便利。而且,这种 crRNA 可直接从前体 crRNA 加工生成,在多重基因编辑场景中表现得游刃有余,科研人员能够借此灵活操控多个基...
研究表明, multiAsCas12a-KRAB 支持在高通量混合筛选中使用6重crRNA 阵列。使用 multiAsCas12a-KRAB,作者发现了增强子元件并测试人类细胞中顺式调节元件的高阶组合扰动。综上所述,作者设计了 multiAsCas12a-KRAB作为基因转录和增强子功能的高阶组合CRISPRi扰动的平台。 (朱娇 摘译)...
可通过crRNA的精心设计以提高靶向切割效应,从而保证检测结果的准确性。(4)高通量检测。大多数基于CRISPR/Cas12的检测平台只能实现对单一肿瘤标志物的定性检测。因肿瘤与多种生物学标志物浓度变化情况紧密相关,故需进一步开发可完成高通量快速检测与定量检测的通用平台。综...
Alt-R® crRNA序列设计示意图 IDT CRISPR-Cas12a(Cpf1)产品 1、crRNA:定制合成的crRNA,包含20-24nt的特异性序列(定制)和20nt的通用序列,经化学修饰,具有核酸酶抗性。需要与Cas12a结合形成RNP复合体。 2、Cas12a核酸酶:包含核定位信号NLS,其中Alt-R® Cas12a Ultra核酸酶增强了对TTTT的PAM识别。
Cas12b是一个可根据crRNA指导进行DNA切割的RNP复合体。在靶DNA的指导下,其核酸酶域会被激活并进行DNA内切,实现了对靶DNA的高效识别和放大。这一原理使其可以作为DNA诊断工具,crRNA的设计决定了其特异性。但是其附带切割效应也使非专属性信号放大成为可能,这需要在应用中加以考量。Cas12b与Cas12a是两种不同的DNA...