最终完成Cre-loxP系统条件性靶基因编辑小鼠研制的操作,通常需要通过floxed小鼠与相应Cre小鼠间的两步遗传交配繁殖过程。第一步交配,X基因Cre杂合小鼠(X基因Cre/+)与Y基因 floxed杂合小鼠(Y基因 lox/+,即CKO打靶Y基因),或Y基因 floxed纯合小鼠(Y基因lox/lox)交配,获得X基因Cre/+; Y基因lox/+ 后代杂合小鼠。第...
Cre鼠常用于与flox鼠杂交进行条件性基因敲除，也有研究将其用于切割位于报告基因前的终止序列，以达到荧光标记特定细胞的目的。改造并优化Cre，结合细胞/组织特异性的调控元件，可实现时空条件性靶基因敲除/表达。赛业生物药物筛选评价小鼠模型平台可为研究人员提供Cre工具鼠、诱导型Cre工具鼠、荧光标记模型等多类型工具鼠...
这里所说的设计主要是 Flox 小鼠的设计。所谓条件性敲除,是说除了特定细胞外,其它细胞里面没有任何的基因表达异常。一般情况下,不要在第一个外显子前面放置 LoxP 序列。因为第一个外显子前面一般是启动子。放置 LoxP 序列有可能会破坏或改变启动子活性。 ...
为构建肝特异性CD36 基因敲除小鼠模型,研究人员利用Cre-loxP 系统开展实验。该系统中的Cre可识别DNA 分子中特定的loxP序列,当DNA 分子上存在两个同向loxP序列时,Cre可将两个loxP序列之间的 DNA序列剪除,切口连接形成的环化产物被降解,从而达到敲除特定基因的目的(如图1)。图2中的 A 鼠成对的 CD36 基因两侧均分...
Cre-LoxP技术构建肝脏特异性HIF-2α基因敲除小鼠模型
杨仕赛等基于Cre/loxP系统,构建了睾丸组织中Elovl4基因特异性敲除的基因缺失小鼠。通过敲除效率检测,发现无论是杂合子还是纯合子基因敲除小鼠,其睾丸组织中Elovl4的表达在mRNA和蛋白水平都显著下调,但其他组织未受影响,为研究基因功能提供了...
心脏中NLRP3炎性小体效应蛋白Caspase-1的表达水平较同窝野生型小鼠显著上调.结论本研究基于Cre-LoxP技术成功构建了NLRP3 T346M突变转基因小鼠模型,该模型小鼠在他莫昔芬诱导后可出现自发性的NLRP3炎症小体活化,这为探究NLRP3炎症小体活化机制以及筛选和评价NLRP3炎症小体抑制剂提供了新的时间特异性的实验动物模型....
Cre-loxP 是一种位点特异的基因重组技术,因其具有非常明显的时空特异、高效性、准确性、快速性等优势,被广泛应用于转基因动物的构建。
RNA干扰联合Cre-loxP系统建立小鼠巨噬细胞RAW264.7 GR表达抑制模型
目的 建立并鉴定高尔基体蛋白73(GP73)胰腺特异性敲除小鼠模型,为后续探究胰腺GP73的生理及病理功能提供基础.方法 采用受精卵同源重组的方式,将两个LoxP位点分别插入GP73基因4号外显子两端,建立GP73flox/+小鼠.将GP73flox/+小鼠与Pdx1Cre+小鼠杂交获得GP73flox/+Pdx1Cre+小鼠,经GP73flox/+小鼠与GP73flox/+Pdx...