第一步交配,X基因Cre杂合小鼠(X基因Cre/+)与Y基因 floxed杂合小鼠(Y基因lox/+,即CKO打靶Y基因),或Y基因 floxed纯合小鼠(Y基因lox/lox)交配,获得X基因Cre/+; Y基因lox/+ 后代杂合小鼠。第二步交配,将X基因Cre/+; Y基因lox/+杂合小鼠,再与Y基因lox/+杂合小鼠,或Y基因lox/lox纯合小鼠交配,从而...
收藏:0 性别:雄 / 雌 周龄:3~8周 繁育方式:杂合 X 野生 品牌:鼠来宝生物 声明:仅用于科学研究,不得用于临床诊断或治疗 产品详情 产品评论(0) 友情链接: 迪米特(试剂耗材) 守正弘药(动物实验) Jackson Laboratory Mouse Genome Informatics (MGI)
二、应用Cre-loxP位点特异性重组系统,实现小鼠条件性靶基因功能研究 三、不同Cre小鼠模型构建策略及方法特点 1. 质粒表达载体的转基因Cre小鼠模型: 2. 定点敲入Cre小鼠模型: 3. BAC转基因Cre小鼠模型: 4. 安全位点敲入Cre小鼠模型: 四、为什么要构建诱导性调控CreERT小鼠模型及其基本特征 五、Cre转基因小鼠模型中...
流式细胞术检测脾脏中各个免疫细胞的YFP的阳性效率按1.2.2的方法提取脾脏的淋巴细胞;将YFP双阳性的带有NKp46-Cre的小鼠淋巴细胞每1×106个细胞制成单个悬浮细胞于3个管,分别标记CD3、CD19、NKp46;分别参加1μL抗体标记的PercificBlue-CD3e,APC-CD19,PE-NKp46,并且每管都参加1μLNKp46的抗体,室温避光30min;30...
Vav1 Cre 转基因小鼠是介导造血系统特异性基因敲除常用的工具鼠[9] ,同时我们引入ROSA26R YFP 报告基因小鼠,与Vav1 Cre 小鼠杂交获得双阳性子代来检测各器官中巨噬细胞的表达效率。通过黄色荧光蛋白(YFP)表达显示造血系统中Vav1 Cre 的表达以及巨噬细胞被 YFP 标记的诱导效率,为进一步研究巨噬细胞的发育和功能...
1.质粒表达载体的转基因Cre小鼠模型:认为是Cre小鼠构建的传统方法,因为最初的Cre小鼠模型,多是应用特定启动子加Cre基因cDNA的质粒载体,通过受精卵原核注射法,获得Cre随机插入基因组的转基因小鼠。 由于启动子大小的限制,只选择了一定范围的表达调控元件序列,构建Cre表达载体,加上转基因随机插入基因组的位置效应影响、拷...
结论YFP报告基因系统在O H T诱导的ER眨cre作用下,能有效标记小鼠造血干祖细胞。【关键词】造血系统;造血干祖细胞;c.ki t+细胞;ERn.cre;Rosa26R—YFP报告基因系统文献标识码:A中图分类号:Q 813;Q 78文章编号:1673-4181(2014)05—0266—05Condi ti ons andeffi ci encyof Rosa26R- YFPreporter gene ...
结论 Vav—Cre介导的YFP报告 基因系统标记小鼠体内NK细胞具有特异性及高效性。 【关键词】 杀伤细胞,天然;免疫系统;基因,报告;小鼠,转基因;杂交,遗传;黄色荧光蛋白;Cre重组酶 【中图分类号】 R392 【文献标志码】 A D【OI】 10.3969~.issn.0253—9896.2014.09.007 TheSpecificityandEfficiencyofYFPLabeledNKCells...
通过基因型分型筛选ROSA26R—YFP与Vav—Cre小鼠杂交后代中双阳性基因型小鼠,流式细 胞术分析免疫器官淋巴结、脾、胸腺以及骨髓细胞的YFP表达效率,通过细胞表面抗体标记淋巴结、脾及骨髓的NK 细胞,流式细胞术分析NK细胞群体中YFP阳性细胞百分比。结果 ROSA26R—YFP与Vav—Cre小鼠杂交后代共 ...
由于Cre重组酶非特异性识别并作用于基因组中与loxP位点相似的序列,也称隐秘loxP(cloxP) 位点,引起Cre-cloxP位点的非特异性重组切割作用,从而有可能导致重要或关键基因破坏,轻则引起非特异性细胞表型,重则研究组织器官破坏或小鼠死亡。 对Tek-Cre小鼠模型进行基因插入位点分析研究表明,由于Cre的随机插入,导致241-kb大小...