1、 如果两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相同,Cre重组酶介导loxP间的序列切除; 2、如果两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相反,Cre重组酶介导loxP间的序列反转; 3、如果两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上,Cre重组酶介导两条DNA链发生交换或染色体易位。 然而,另需要注意的是,A、B、C三种情况也有可能...
2.如果两个 loxP 位点位于一条 DNA 链上,但方向相反,Cre 重组酶能导致两个 loxP 位点间的序列翻转; 3.如果两个 loxP 位点分别位于两条不同的 DNA 链或染色体上,Cre 酶能介导两条 DNA 链的交换或染色体易位。 Cre-loxP重组酶系统的优点 1.高效性:Cre重组酶与具有 loxP 位点的 DNA 片段形成二聚...
01高效性Cre重组酶与具有loxP位点的DNA片段形成复合物之后，可以提供足够的能力引发之后的DNA重组过程，重组过程简约高效；重组不受切除片段长短及位置影响，可以在活体动物体内实现，可随细胞分裂和动物传代稳定遗传。02 特异性强 loxP位点是一段含回文序列结构和中间有间隔的34bp元件，这种结构保证了loxP序列的唯...
loxP位点 locusof X-overP1来源于噬菌体P1，是一段长度为34bp的DNA序列，包括两个13bp的反向重复序列和一个不对称的8bp间隔区组成。反向重复序列是Cre重组酶的特异识别位点，而间隔区域决定了loxP位点的方向。其序列如下：ATAACTTCGTATA- NNNTANNN- TATACGAAGTTAT （N表示碱基可能发生变化）Cre-loxP系统作用方式 ...
此外,还有RecA重组敲除系统(由RecA和RecBCD蛋白组成,在基因敲除时必须以环状质粒存在)、结合转化敲除系统及温度敏感型质粒敲除系统等可供选择。 2FLP-FRT系统和Cre-loxP系统 这两个系统都是位点特异性重组酶系统,其中FLP-FRT源于酿酒酵母,Cre-loxP源于F1噬菌体。两个系统的基本原理类似。以Cre-loxP系统为例,该系统...
一、Cre-loxP位点特异性重组系统应用基本原理 所谓Cre-loxP位点特异性重组系统,源于噬菌体P1中,存在Cre重组酶(343个氨基酸蛋白,4个亚单位组成)及其能特异识别的一对34 bp的DNA序列(即loxP位点),并根据两个loxP位点的方向性,将两loxP位点之间的DNA序列(也称floxed区域)进行特异性重组切割或反转。
Cre-loxP重组系统 条件性基因打靶、诱 导性基因打靶、时空 特异性基因打靶策略 的技术核心 Cre重组酶 于1981年从P1噬菌体中发现,属于λ Int酶超基因家族。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能识别特异的 DNA 序列,即 loxP 位点。它是一种位点特异性重组酶,能介导两个L...
3)Cre-loxP系统的编辑效果 A. 删除(Deletion):当两个loxP位点在同一DNA链上并且同向排列时,Cre重组酶会删除两个loxP位点之间的DNA序列,并将剩余的DNA片段重新连接。这个过程几乎是不可逆的,也是最常用的方式。 B. 反转(Inversion):当两个loxP位点在同一DNA链上但反向排列时,Cre重组酶会使两个loxP位点之间的DNA...
传统的Cre-loxP重组酶系统存在早期胚胎致死和长期表达的毒性问题。 近年来,科学家将合成生物学理念融入Cre-loxP重组酶系统中,开发出了一系列调控式的Cre-loxP重组酶系统,但是这些诱导系统仍然具有一定程度的毒性,且组织穿透性差,这些都极大地限制了Cre-loxP重组酶系统在动物体内的应用。