Cre-loxP 主要用于基因敲除，但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。2常用的 Cre-loxP 诱变系统 图 2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统Cre-ER (Tam) 系统，也称为他莫昔芬 (Tamoxifen) 诱导的 Cre 系统，是 Cre-LoxP 系统中最为...
Cre-loxP 主要用于基因敲除,但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。 02 常用的 Cre-loxP 诱变系统 图2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统 Cre-ER(Tam)系统,也称为他莫昔芬 (Tamoxifen)诱导的 Cre 系统,是 Cre-LoxP 系统中最为...
Cre重组酶识别的回文DNA位点,也叫loxP (locus of X-over P1) 位点,长34bp,其特征结构为ATAACTTCGTATA-NNNTANNN-TATACGAAGTTAT。两边反向互补的13个碱基为Cre重组酶的识别序列,中间的8个碱基为重组发生位置,这也决定了loxP的方向。N表示可变碱基,不同的碱基选择可形成不同的 Lox位点,除了野生型loxP,常见的还有...
Translocation（易位）：当两个loxP位点分别位于两条不同的染色体上且方向一致时，Cre重组酶会诱导这两条染色体上的DNA序列进行交换。图 Cre的重组机制 0Cre-loxP系统的应用 通过Cre-loxP系统，我们能够在小鼠体内实现对基因的时空特异性调控，无论是表达还是敲除。这一过程需要构建两种特定的小鼠模型。首先，需要创建Cr...
图1 Cre-LoxP基本作用原理 一、Cre-LoxP系统基本作用方式 一般而言，当细胞基因组内存在两个LoxP位点时，Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。重组的结果取决于两个LoxP位点的方向，主要有以下几种可能： 1、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，但方向相反，Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列翻转；2、...
在FLEX-ON系统中,目的基因反方向位于启动子下方,两侧分别连接两个“头对头”的loxP。Cre重组酶不存在时,目的基因不能表达;当Cre重组酶存在时,可以诱导目的基因的“翻转”,从而表达。 图3. 维真生物提供依赖Cre的FLEX-ON系统示意图 图4. 维真生物的FLEX-ON实验图 ...
Cre-LoxP系统是一种重组酶系统,能够控制基因组DNA中位点特异性重组的发生,被广泛应用于特异位点的基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位,可达到在基因水平上对生物体进行定向遗传改造的目的,其主要由Cre与LoxP两部分组成。 Cre是一种重组酶,于1981年从P1噬菌体中发现,属于λInt酶超基因家族。Cre重组酶,能够特异性...
同源重组示意图 一、Cre/Loxp系统 Cre重组酶（37℃）➢位点特异性重组酶，介导loxp位点间的序列同源重组 ➢70%重组率，无需辅助因子，多种结构的DNA底物 Loxpsite ➢34bp反向重复序列 Flp/Frt重组系统 P1噬菌体 （1）重组方式 （2）基因敲除机理 Offspring：50%heterozygousknockoutafter1generation 基因敲除...
Cre-loxP重组系统 条件性基因打靶、诱 导性基因打靶、时空 特异性基因打靶策略 的技术核心 Cre重组酶 于1981年从P1噬菌体中发现,属于λ Int酶超基因家族。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能识别特异的 DNA 序列,即 loxP 位点。它是一种位点特异性重组酶,能介导两个...
【题文】Cre/loxP重组酶系统是对转基因受体细胞DNA上的特定序列进行定点切割和重新连接,从而在基因或染色体水平上对生物基因进行遗传改造的一种技术。请回答下列问题:③