摘要:Cre-lox系统是以小鼠作为研究工具,可对体内进行组织时空特异性的基因敲除、敲入及示踪。Cre-lox系统因其成熟高效的特性,已被广泛应用于各项体内实验研究中。 Cre- lox系统 是以小鼠作为研究工具,可对体内进行组织时空特异性的基因敲除、敲入及示踪。Cre-lox系统因其成熟高效的特性,已被广泛应用于各项体内实验研...
lox2272是也是一种常用的lox位点,类似的还有loxN、lox511等。lox2272与loxP互不相容,分别接受Cre酶的重组作用。在DIO结构中,Cre通过loxP和lox2272的一次翻转和一次删除,从而实现对目的基因的翻转和不可逆,最终实现对目的基因Cre依赖的表达。 3.DO序列(Cre-off) 插入基因与启动子方向一致,在Cre重组酶存在的情况下会...
什么是Cre-lox系统? 从名字就能知道这套系统的两个主要组成部分: Cre重组酶 环化重组酶(Cre, cyclization recombinase),是酪氨酸位点特异性重组酶之一,能催化两个DNA识别位点之间的位点特异性重组。Cre重组酶来源于P1噬菌体,由 343个氨基酸组成,能特异性地识别Lox位点。除Cre以外,此类重组酶还有Flp(flipase)和Dre(...
Reporter小鼠一般是在Rosa26位点插入带有lox-stop-lox终止盒以及报告基因(LSL-R)的一种工具小鼠,只有Cre酶介导重组切除终止盒后,才会有报告基因的表达。例如需要验证GeneX-Cre定点整合小鼠,可将Cre杂合子小鼠(GeneXCre/wt)与Reporter杂合子(Reporter lox/wt)或纯合子(Reporterlox/lox)小鼠交配,通过免疫组化、免疫荧...
Cre-Lox基因重组系统是一种被广泛应用于特异性基因敲除、基因易位、基因翻转以及基因插入等操作的基因重组手段。 Cre重组酶(cyclization recombination enzyme)最早于1981年在P1噬菌体中发现,该酶由343个氨基酸组成,除了拥有催化活性外,同时还可以识别特定序列:Loxp位点,该位点同样在P1噬菌体中被发现,序列长度为34bp[1]...
2. 什么是LoxP loxP是一段长34bp的DNA序列,是重组酶识别的位点,被称为loxP位点(10cus of X—over in P1)。 参考资料: https://info.abmgood.com/blog/introduction-to-cre-lox https://www.addgene.org/cre-lox/ 这些LoxP结构允许crec调控基因表达,Cre可激活或抑制基因表达,这取决于其结构。常见构造类型...
图1:loxP位点及其突变体位点 02 Cre/loxP系统的工作原理 我们知道loxP位点是一个34bp的短DNA序列,包括两个反向重复序列和一个核心序列。核心序列决定重组事件的方向性。在同一个 DNA 分子上,根据Lox位点的位置与方向,可能会发生3种不同的重组事件: 展开剩余 80 % 评论...
Cre-lox 技术技术自 20 世纪 80 年代初被发现以来,作为一种使用广泛的复杂工具,如今已经成为小鼠基因组研究领域的最精巧的方法,对生物医学研究和基因工程可谓是影响深远。研究人员正利用这些模型开展各种研究,包括特定疾病研究和小鼠解剖图谱的可视化展示。
什么是Cre/Lox System? 顾名思义,Cre/Lox System借助于Cre 重组酶(Cre recombinase)以及它的识别位点 loxP。 好处在于,这两者需要我们从P1 噬菌体(bacteriophage)中进行提取和重塑成为我们可以用的工具。loxP是一个单向的由34个碱基对组成的识别位点。它除了会在P1噬菌体中出现,并不会在其他任何已知基因组中出现,...