这里我们只是简单地模拟一下,真正的应该是除以1000000,RPKM/FPKM/TPM/CPM的M指的就是million,此处只是为了方便展示。2、再将每个样本中的基因分别除以上一步得到的结果。例如对于Rep1中的基因A来说,就是使用10除以3.5,得到2.86。这个结果我们记为reads per million(RPM)。 第二步:校正基因长度
counts2FPKM<-function(count=count,efflength=efflen){PMSC_counts<-sum(count)/1e6#counts的每百万缩放因子(“per million” scaling factor)深度标准化FPM<-count/PMSC_counts #每百万reads/Fragments(Reads/Fragments Per Million)长度标准化FPM/(efflength/1000)}#FPKM与TPM的转化FPKM2TPM<-function(fpkm){fp...
综上所述,CPM、RPKM/FPKM和TPM方法在RNA-Seq数据标准化中各有优势,考虑不同因素影响。CPM适合样本内比较,而RPKM/FPKM和TPM更适用于更广泛的比较场景。
1. 学术界已经不再推荐RPKM、FPKM; 2. 比较基因的表达丰度,例如哪个基因在哪个组织里高表达,用TPM做均一化处理; 3. 不同组间比较,找差异基因,先得到read counts,然后用DESeq2或edgeR,做均一化和差异基因筛选;如果对比某个基因的KO组和对照,推荐DESeq2。 Read count 数值概念:比对到某基因的reads数。 用途...
即FPKM=比对到某基因的片段数先除以比对到参考基因组的总片段数, 再除以该基因外显子长度之和(单位为 kb),与RPKM计算方法类似。在双端测序中,一个 DNA 或 RNA 片段会产生两个 reads(一对 reads),这一对 reads 代表一个完整的片段。 RPKM-FPKM 4。 TPM(Transcripts Per Million) 每百万转录本,一种基因表...
2. RPKM(Reads Per Kilobase per Million Mapped Reads)或FPKM(Fragments Per Kilobase per Million Mapped Fragments)是衡量基因表达水平的一种方法。它通过将百万条映射到基因组的读段数除以基因长度和总映射读段数来计算,以标准化不同样本之间的测序深度和基因长度。3. RPM(Reads Per Million)...
他人总结:CPM只考虑了测序深度,RPM只考虑了基因长度,RPKM和FPKM同时考虑了基因长度和深度,TPM不仅考虑了基因长度和深度,还考虑了基因表达量总和一致,其中CPM和TPM由于总表达量相等,可以用来做差异分析。 相关R代码 https://www.cxyzjd.com/article/weixin_29014237/113052831...
-RPKM:以每个Read为一个单位,单端测序常用 -FPKM:以Fragment一个单位,主要在双端测序 (这两个很相似,都是先标准化测序深度,再标准化基因长度)-目前推荐使用TPM (TPM先标准化基因长度,再标准化测序深度) 【标准化后每个样本的total TPM是相同的,可以更易看出what proportion of ...
为什么要对RNA-seq测序数据进行标准化CPM/RPKM/FPKM/TPM分别怎么计算, 视频播放量 7527、弹幕量 32、点赞数 179、投硬币枚数 87、收藏人数 213、转发人数 45, 视频作者 张丢丢不能丢东西, 作者简介 嗨,生物信息,相关视频:梦中杀人 7名少女尸体被漂白制成娃娃供人淫乐 科