对于准备进行质谱分析的coip样品,确保洗脱液中没有对质谱有干扰的物质至关重要,一般来说,可以使用以下类型的洗脱液进行洗脱 : 1.高盐浓度溶液: 如2M NaCl,这可以帮助中和蛋白与beads之间的离子相互作用。 2.SDS-PAGE样品缓冲液: 可以用来直接洗脱蛋白并用于SDS-PAGE电泳,然后进行质谱分析。 3.酸性溶液: 如0.1M醋...
您可以尝试进行质谱分析以确定两个蛋白质之间的结合位点。在COIP后，您需要对样品进行一些额外的净化步骤...
当您表达出蛋白质后,进行质谱分析和CO-IP实验的顺序通常是先进行CO-IP实验,再利用质谱技术鉴定CO-IP拉下的互作蛋白。 1.CO-IP实验(Co-immunoprecipitation): CO-IP实验是一种用于研究蛋白质相互作用的实验方法。在COIP实验中,您会使用特定的抗体来免疫沉淀(immunoprecipitation)目标蛋白质。通过这种方式,您可以将与...