CoIP实验方法步骤详解：一、细胞的收集及裂解 收集2E7个细胞样品，加入PBS洗涤细胞，离心后弃上清收集细胞沉淀。准备500 μl 预冷的 Cell Lysis Buffer,分别加入5 μl Protease Inhibitor、5 μl PMSF，混匀后加进细胞沉淀中吹打均匀，冰上孵育 30 min，期间涡旋混匀几次。4℃,12000 rpm 离心10 min，取上清，...
后续实验表明,FREE1通过抑制ABF4、ABI5对下游基因的调控能力,参与了脱落酸信号通路。 使用相关技术:质谱鉴定、免疫共沉淀CoIP、Co-IP MS实验 2. Jiang, S. et al: Cholesterol Induces Epithelial-to-Mesenchymal Transition of Prostate Cancer Cells by Suppressing Degradation of EGFR through APMAP.Cancer Researc...
COIP-MS实验: COIP-MS基于抗原-抗体免疫反应,在细胞裂解液中加入抗原特异的抗体进行孵育,若裂解中有和抗原互作的蛋白,则会形成“抗体-抗原-抗原互作蛋白”的免疫复合物,该免疫复合物经protein A/G beads纯化,洗脱、收集,经质谱鉴定即可得到与抗原互作的蛋白。
③将所有细胞刮下，收集到离心管，置于冰上。④冰浴中对样品用超声处理3次，每次5秒钟。（此步骤对...
### 实验步骤 1. **样品准备**:首先,需要准备含有足够量目标蛋白的细胞或组织样品,并通过裂解液破碎细胞,释放蛋白质。 2. **预清理**:使用适当的非特异性抗体和蛋白A/G珠子对裂解液进行预清理,以去除非特异性结合的蛋白质。 3. **免疫共沉淀**:向预清理后的裂解液中加入特异性抗体,通过温和的旋转混合让...
2. Co-IP MS，用于筛选某样本中的诱饵蛋白与哪些蛋白具有相互作用。辉骏生物可围绕以上2种coip免疫共沉淀实验做高度课题服务，对蛋白互作的筛选鉴定理解深刻，擅长针对客户具体情况提出合适的方案建议。自有蛋白质组学平台，对微量CoIP实验产物的质谱鉴定有十足的把控能力，对后续的生物信息分析有独到的见解。
Co-IP调取诱饵蛋白及其互作蛋白(2组:实验组、对照组) IP产物的诱饵蛋白Western blot检测图 IP产物的待测蛋白Western blot检测图 CoIP实验报告 Co-IP MS (筛选型) 样本质检(Western blot检测诱饵蛋白) 样本的诱饵蛋白Western blot检测图 6-7周 实验样本 诱饵蛋白的IP级抗体 实验信息表 点击询价 Co-IP调取诱饵...
Co-IP实验详细步骤: 1、预冷PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机。 2、用预冷的PBS洗涤细胞两次,最后一次吸干PBS。 3、加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶,0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿、75cm2培养瓶)。 4、用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培...
北京免疫共沉淀CoIP-MS检测 IP-WB(免疫沉淀-Western Blot)是一种常用的实验方法,用于验证蛋白质之间的相互作用。在IP-WB实验中,首先使用特异性抗体将目标蛋白从细胞或组织裂解液中免疫沉淀下来。这一步骤确保了只有与目标蛋白特异性结合的蛋白质被富集。随后,将免疫沉淀得到的蛋白质复合物进行SDS-PAGE凝胶电泳,使...
1、鉴定coip特异性：首先需要确定Co-IP是否有特异性，确认共沉淀下来的蛋白质是否只是与目标蛋白物质有相互关系。可以通过WB或MS等技术验证。2、分析共沉淀蛋白的数量和性质：在Co-IP实验得到的蛋白质电泳图中，共沉淀的蛋白质会在各自的位置上出现。可以使用荧光染色或银染色技术等方式对电泳图进行染色，...