IP:immunoprecipitation 免疫沉淀(纯化目的蛋白)IB:immunoblotting 免疫印迹,即Western Blotting(显示目的蛋白)HA:带有HA标签的蛋白(抗HA抗体来显示目的蛋白)Input:阳性对照,就是用IP之前的裂解液做IB(排除假阳性干扰)这个实验结果说明:Pi13蛋白与AtCaM蛋白之间存在相互作用。不懂,请追问。。。...
2. 取少量裂解液以备Western blot分析(Input),剩余裂解液加1μg相应的抗体到细胞裂解液,4°C缓慢摇晃孵育过夜;对照组直接加入跟所用抗体同种型对照; 3. 取10μl protein A琼脂糖珠,用适量裂解缓冲液洗3次,每次3,000 rpm离心3 min; 4. 将预处理过的10μl protein A琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞...
Input指的是总蛋白,属于阳性对照,IP是用相应的抗体沉淀相应的蛋白,IB指互作信号。 5、Co-IP实验对抗体有什么要求? 若是自身蛋白抗体,抗体需要达到IP级别,并且需要测试其效价,商业化的标签抗体也需要达到IP级别。 6、Co-IP实验如何避免出现假阳性? (1)若抗体浓度高,则降低抗体浓度; (2)若抗体特异性不好,则更...