1.预冷PBS洗涤细胞3次,最后一次吸干PBS;2.每个含细胞的1.5ml EP管中加入预冷的等体积的IP细胞裂解缓冲液700ul(预先加入5ul的蛋白酶抑制剂),混合器上4℃裂解30min;3.16000g,4℃离心15min,取80ul上清作为Input,另分别取300ul及300ul上清于新的1.5ml EP管中,作为IP样及IgG样本;4.IP样本中加入2~5...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)是研究蛋白-蛋白间相互作用的经典方法,属于免疫沉淀技术的一类,常被用于鉴定特定蛋白复合物的中未知蛋白组分。免疫共沉淀的设计理念是,假设一种已知蛋白是某个大的蛋白复合物的组成成员,那么利用这种蛋白的特异性抗体,就可能...