免疫共沉淀(Co-IP)是一个用于检测两种或多种蛋白质之间在细胞内是否存在物理互作的技术。其原理是基于抗体的特异性结合能力,利用抗体与目标蛋白质结合形成免疫复合物,然后通过沉淀技术将免疫复合物与其它相互作用的蛋白质一起沉淀下来,从而实现对目标蛋白质与其相互作用蛋白质的检测: ...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,用于确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用。Pull-down 技术又称蛋白质体外结合实验(Binding assay in vitro), 是一种行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术,可用于初步研究两种蛋白质...
IP(免疫沉淀):利用抗体去特异性结合抗原(样品中的目标蛋白),以寻找或验证与抗体有相互作用的蛋白、纯化富集目的蛋白的;Co-IP(免疫共沉淀):利用抗体去识别并结合两个相互作用的蛋白,可以验证两种已知蛋白是否存在相互作用,或者验证在样品总蛋白中是否含有与已知蛋白相互作用的未知蛋白;Pull down:与IP的作用类似,只是二...
免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法,主要是用于抗原或抗体的定性检测,以及纯化目的蛋白质的常规方法。 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。这种方法常用于测定...
1、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP)、Gst pull-down的区别? 免疫共沉淀:免疫共沉淀与免疫沉淀技术所使用的原理与方法大致相似,是一 种在探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理是如果 两个蛋白在体外体系能够发生特异性相互作用的话,那么当用一种蛋白的抗体 进行免疫沉淀时,另一个蛋白也...
co-IP(免疫共沉淀):可对两种已知蛋白是否存在相互作用进行验证,也可以验证在总蛋白中是否含有与已知蛋白相互作用的未知蛋白。 Pulldown:带标签的诱饵蛋白能被特异结合该标签的固相亲和配基捕获,形成“次级亲和支持物”,用于纯化与诱饵蛋白相互作用的其他蛋白。可用来证明两种已知蛋白间存在的相互作用或寻找与已知蛋白直接...
Co-IP实验要点: 二、免疫沉淀 1.取1mg蛋白样品,用裂解液稀释到1ml 2.加入40ul protein G agrose,1ug IgG,在4℃旋转混合2h,然后用4℃离心机1000g离心5min,取上清,以去除非特异性的结合。 3.加入2ug的一抗,40ul protein G agrose,在4℃旋转混合过夜。 4.用4℃离心机12000g离心1min,弃上清。 5.用1...
可以用质谱鉴定这个蛋白复合物中的其他成员,高效筛选鉴定未知互作蛋白。运用LC-MS/MS技术对Co-IP所捕获...
Co-IP 实验原理:如果细胞内两蛋白(A、B)有直接或间接的相互作用时,那么在温和的裂解条件下获得的蛋白样品中加入 A 蛋白的抗体将 A 蛋白沉淀下来,在细胞内与 A 蛋白直接相互作用的 B 蛋白或