因此,如何简洁并有效的设置分组来明确蛋白间是否互作是CO-IP实验的关键因素之一。 一个成功的Co-IP实验,首先得证明靶蛋白A和预测的相互作用的蛋白B存在于蛋白质样品中,所以抽出来的蛋白样品要直接检测一下A和B的存在,这个一般称为Input。 然后要证明IP抗体是不是能拉下来靶蛋白,所以做完IP后要检测一下靶蛋白。我...
在免疫沉淀串联质谱（IP-MS）实验过程中，质谱检测环节对于实验组和对照组是一致的，其差异主要体现在IP实验环节，在进行Co-IP后做质谱实验分组的设计时，重点需要明确IP环节中的实验阳性对照和阴性对照。对照组的设置是最关键的环节之一，控制变量是对照组设置的重要原则，在IP-MS实验设计中亦是如此。阳性对照的目的...
CO-IP后做质谱实验分组的设计 免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等基质上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的一种方法。免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法，通过使用诱饵蛋白（IP中的抗原，bait protein）特异性抗体间接捕获与其结合的...